腫瘤抑制基因Maspin在口腔鱗癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：口腔鱗狀細(xì)胞癌(Oral squamous cell carcinoma，OSCC)是最常見的口腔惡性腫瘤，對其癌前病變和早期惡變的識別和治療是OSCC早期診斷和預(yù)防的重要措施。在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中，蛋白酶和蛋白酶抑制劑起著非常重要的作用。蛋白酶能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)，而蛋白酶抑制劑具有阻斷這一過程的能力。新近發(fā)現(xiàn)的絲氨酸蛋白酶抑制劑(serpins)超家族的其中一個(gè)成員-Maspin，在乳腺癌、前列腺癌、胃癌等多種腫瘤中已被證實(shí)

2、具有腫瘤抑制活性。已有研究表明，Maspin基因通過阻斷腫瘤細(xì)胞的遷移和增殖，抑制侵襲和轉(zhuǎn)移過程。Maspin基因在絕大多數(shù)的人類組織中有不同程度的表達(dá)，而在腫瘤的進(jìn)展過程中多數(shù)表現(xiàn)為下調(diào)。近年來有報(bào)道，Maspin基因有抑制新生血管生成的作用，它能夠阻斷在體和離體血管的生成，進(jìn)而降低腫瘤的微血管密度以及抑制腫瘤的生成。另有新的證據(jù)表明，Maspin基因與P53基因腫瘤抑制途徑相互作用，在部分腫瘤中，Maspin基因的表達(dá)與突變型P53

3、基因的水平呈負(fù)相關(guān)，這表明在體內(nèi)，Maspin基因可能是P53基因的靶基因。Maspin基因在乳腺、前列腺、結(jié)腸和口腔鱗狀上皮等正常組織中出現(xiàn)高表達(dá)，而在相應(yīng)的腫瘤組織中表達(dá)下調(diào)，并與腫瘤的組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、局部復(fù)發(fā)或腫瘤進(jìn)展、生存期的長短以及突變型P53蛋白陽性等諸多因素相關(guān)。這與其具有的腫瘤抑制功能是非常一致的。但也有研究表明，Maspin基因在胰腺癌和卵巢癌中出現(xiàn)異常的高表達(dá)，即在正常組織中不表達(dá)或者低表達(dá)，而在相應(yīng)的癌組織

4、中則出現(xiàn)表達(dá)上調(diào)。關(guān)于Maspin基因在胃癌組織中的表達(dá)有兩種截然相反的報(bào)道。Maass等在6個(gè)胃癌細(xì)胞系中并沒有檢測到Maspin基因的mRNA。而Son等發(fā)現(xiàn)腸上皮化生區(qū)和胃腺癌的Maspin蛋白表達(dá)明顯要高于非癌黏膜，并且與mRNA的表達(dá)是一致的。本課題對Maspin蛋白在OSCC、癌旁組織和口腔正常組織的表達(dá)進(jìn)行研究，探討其在口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用，為臨床上的應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法：收集入院前未接受放療和化

5、療的OSCC患者的手術(shù)切除標(biāo)本共45例，其中男性32例，女性13例，年齡42～74歲，平均年齡54歲，患者均無其他惡性腫瘤或嚴(yán)重的內(nèi)科疾病，術(shù)前均未經(jīng)過放、化療，發(fā)生部位：頰部4例，面部皮膚3例，舌緣、舌腹及舌根部15例，口底11例，牙齦6例，下頜骨1例，軟腭4例，咽旁1例，按WHO口腔鱗狀細(xì)胞癌組織分型標(biāo)準(zhǔn)分級，并切除癌旁組織共33例；以唇裂修補(bǔ)術(shù)切除的唇部組織及口腔良性病變周圍切除組織共15例作為正常對照組織，其中男性8例，女性7例

6、，年齡6月～90歲，平均年齡45.12歲，取材部位：唇部4例，面部3例，口底2例，舌部3例，牙齦3例。所取組織用4％的中性甲醛固定液固定24小時(shí)，石蠟包埋，做5um厚的連續(xù)切片，用鼠抗人Maspin單克隆抗體以及S-P法進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。Maspin蛋白以細(xì)胞核或者細(xì)胞漿中出現(xiàn)明顯的黃色或棕黃色顆粒為陽性表達(dá)；采用半定量積分法判斷結(jié)果，每張切片隨機(jī)選5個(gè)高倍視野觀察，計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，若陽性細(xì)胞數(shù)≤5％為0分，6％～25％為1分，2

7、6％～50％為2分，51％～75％為3分，>75％為4分：陽性強(qiáng)度黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分，兩者積分相乘，0～1分為陰性(-)：2～6分為陽性(+)；8～12分為強(qiáng)陽性(++)。將(+)，(++)歸為表達(dá)陽性組計(jì)算其陽性率。 結(jié)果：1.在口腔正常組織、癌旁組織和口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中Maspin蛋白表達(dá)分別為86.66％(13/15)，72.72％(24/33)和37.78％(17/45)，得x2=15.1843，P

8、=0.0005(P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；2.Maspin蛋白在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織、癌旁組織和相應(yīng)正常組織中表達(dá)是逐漸增高，其中癌組織和正常組織、癌組織和癌旁組織、癌旁組織和正常組織之間表達(dá)差異有顯著性(P<0.05)；3.Maspin蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(z=2.4537，P=0.0141)、(r=-0.37215 P=0.0118)(P<0.05)；與組織學(xué)分級有關(guān)(z=2.2647，P=0.0235)，(r=-0.3

9、4372，P=0.0208)(P<0.05)；與TNM分期無關(guān)(z=0.7400，P=0.4593)，(r=-0.11374 P=0.4569)(P>0.05)。 結(jié)論：1.Maspin基因在口腔鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展過程中可能起著重要作用。2.口腔鱗狀細(xì)胞癌中Maspin蛋白的表達(dá)與TNM分期無關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級有關(guān)。3.檢測口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中Maspin蛋白的表達(dá)水平可能有助于對淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移潛能的預(yù)測。4.檢測口腔鱗