大腸癌肝轉(zhuǎn)移中蛋白質(zhì)差異表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：應(yīng)用表面增強(qiáng)激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜蛋白質(zhì)芯(SELDI-TOF-MS)聯(lián)合激光顯微切割(LCM)技術(shù)篩選大腸癌及其肝轉(zhuǎn)移標(biāo)志蛋白，探討大腸癌特異性標(biāo)志物，為大腸癌及其肝轉(zhuǎn)移的早期診斷、預(yù)后判斷和治療提供幫助。
　　方法：采用LCM技術(shù)獲取24例大腸癌肝轉(zhuǎn)移患者正常大腸、原發(fā)灶及肝轉(zhuǎn)移灶癌細(xì)胞；應(yīng)用SELDI-TOF-MS技術(shù)對其行蛋白質(zhì)譜分析并采用Biomarker Wizard軟件分析差異蛋白；通過查詢蛋白庫對特定分子質(zhì)

2、量所對應(yīng)的標(biāo)記蛋白進(jìn)行初步確定；選取其中有意義的差異蛋白質(zhì)S100A11和Raf激酶抑制蛋白(RKIP)分別通過血清ELISA和組織IHC進(jìn)行驗證。
　　結(jié)果：比較正常大腸、原發(fā)灶及肝轉(zhuǎn)移灶3組細(xì)胞間的SELDI質(zhì)譜圖，發(fā)現(xiàn)大腸癌原發(fā)灶與正常大腸兩組間存在15個標(biāo)志蛋白，12個表達(dá)上調(diào)，3個表達(dá)下調(diào)；大腸癌肝轉(zhuǎn)移灶與原發(fā)灶兩組間存在9個標(biāo)志蛋白，5個表達(dá)上調(diào)，4個表達(dá)下調(diào)。其中質(zhì)荷比（m/z）為4676.63 Da，11740.8

3、7Da，21063.59Da和22783.36Da的蛋白峰差異性最為明顯（P<0.01)。通過查詢ExPasy蛋白庫并進(jìn)行篩選初步確定特定分子質(zhì)量所對應(yīng)的蛋白分別是細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)Bax蛋白γ亞型、蛋白質(zhì)S100A11、Raf激酶抑制蛋白(RKIP)和熱休克蛋白27(HSP-27)，其中蛋白質(zhì)S100A11和HSP-27表達(dá)上調(diào)，而細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)Bax蛋白γ亞型和RKIP蛋白表達(dá)下調(diào)，對蛋白質(zhì)S100A11和Raf激酶抑制蛋白(RKIP)行血