不同生長期晶狀體蛋白對(duì)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存活的促進(jìn)作用及機(jī)制研究.pdf

1、中南大學(xué)博士學(xué)位論文不同生長期晶狀體蛋白對(duì)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存活的促進(jìn)作用及機(jī)制研究姓名：王文軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：唐羅生20080501博+ 學(xué)位論文 中文摘要生長期晶狀體蛋白對(duì)體外培養(yǎng)R G C s 的存活和突起生長的促進(jìn)作用是否存在差異。然后應(yīng)用雙向凝膠電泳技術(shù)比較不同生長期晶狀體可溶性蛋白的電泳譜，尋找變化顯著的蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜分析，進(jìn)而推導(dǎo)出發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的晶狀體蛋白確切成分。為視神經(jīng)損傷和再生的基礎(chǔ)研

2、究提供理論依據(jù)，為臨床治療視神經(jīng)損傷探索可行方法。方法：l 建立S D 大鼠R G C s 體外培養(yǎng)模型及鑒定技術(shù)。2 提取l d 、2 w 、6 m 、l y e a r 生長期的大鼠晶狀體可溶性蛋白，分別將不同生長期的晶狀體可溶性蛋白加入基礎(chǔ)培養(yǎng)液中對(duì)R G C s 進(jìn)行體外培養(yǎng)，觀察R G C s 在體外存活的時(shí)間，測量培養(yǎng)l 、3 、5 、7 、9 d 時(shí)R G C s 的最長突起長度、細(xì)胞活性及細(xì)胞凋亡百分率，并進(jìn)行組間比較。

3、3 分別對(duì)不同生長期的晶狀體可溶性蛋白進(jìn)行雙向凝膠電泳，用圖像分析軟件對(duì)各組得到的電泳圖譜進(jìn)行對(duì)比、分析。從分析結(jié)果中選取上調(diào)最為顯著的部分蛋白質(zhì)點(diǎn)，利用質(zhì)譜鑒定技術(shù)鑒定選取的蛋白質(zhì)點(diǎn)，明確其成分。結(jié)果：l 成功建立S D 大鼠體外培養(yǎng)R G C s 模型，體外培養(yǎng)的R G C s 具有3 種主要形態(tài)，存活時(shí)間在7 ～1 0 d 。使用抗大鼠T h y l ．1 單克隆抗體可以鑒定體外培養(yǎng)的R G C s 。2 不同生長期晶狀體可溶性蛋