選擇性環(huán)氧合酶2及5-脂氧合酶抑制對(duì)食管鱗癌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的：比較COX-2/5-LOX雙酶活性化學(xué)抑制及選擇性COX-2酶活性化學(xué)抑制對(duì)食管鱗癌(ESCC)細(xì)胞增殖的影響及可能機(jī)制，尋找食管癌化學(xué)預(yù)防的有效途徑。
　　 方法：采用COX-2/5-LOX雙途徑酶抑制劑licofelone和選擇性COX-2抑制劑NS-398，設(shè)立藥物干預(yù)組、空白對(duì)照及溶媒DMSO組。分別以25μM、50μM、75μM和100μM濃度作用ESCC TE-1細(xì)胞24h及48h，CCK-8(四唑單鈉鹽)法檢

2、測(cè)細(xì)胞增殖；RT-PCR和Western blot檢測(cè)干預(yù)前后COX-2/5-LOX mRNA及蛋白表達(dá)； ELISA法檢測(cè)下游代謝產(chǎn)物PGE2和LTB4含量；流式細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞周期。
　　 結(jié)果：1、NS-398對(duì)細(xì)胞增殖的抑制呈非濃度依賴性，其中50μM處理24h及25μM、50μM及100μM處理48h后細(xì)胞出現(xiàn)生長抑制(P＜0.05)，其他各組細(xì)胞生長與對(duì)照組無明顯差異(P＞0.05)；licofelone的抑制細(xì)胞生長作

3、用則呈濃度及時(shí)間依賴性，除25μM處理24h組細(xì)胞生長與對(duì)照組無明顯差異(P＞0.05)外，更高濃度各組均出現(xiàn)細(xì)胞生長抑制(P＜0.05)。2、licofelone及NS-398對(duì)TE-1細(xì)胞COX-2 mRNA及蛋白表達(dá)均有時(shí)間、濃度依賴性抑制作用，而對(duì)5-LOXmRNA及蛋白的時(shí)間、濃度依賴性表達(dá)抑制僅見于licofelone處理組。3、NS-398及l(fā)icofelone對(duì)PGE2濃度均有濃度及時(shí)間依賴性抑制作用，與對(duì)照組相比有顯著

4、性差異(P＜0.05)。LTB4水平在licofelone組被顯著抑制，而在NS-398組則高于對(duì)照，且除100μM組外各組與對(duì)照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。4、100μM licofelone及50μM NS-398作用24h后TE-1細(xì)胞分別有67.1％、63.8％處于G0/G1期，16.8％、17.3％處于S期，與對(duì)照組相比有顯著性差異(P＜0.05)，100μM NS-398對(duì)細(xì)胞周期無影響(P＞0.05)。