富硒女貞子緩解山羊熱應(yīng)激效果的研究.pdf

1、中獸醫(yī)病因病理及辯證診治的基礎(chǔ)理論認(rèn)為，熱應(yīng)激是由于高熱邪氣所致的陽盛陰虛病證，而中藥女貞子具有滋陰補(bǔ)腎之功效;本課題組前期研究結(jié)果顯示富硒女貞子能有效降低急性熱應(yīng)激小鼠的死亡率，緩解熱應(yīng)激造成小鼠的肝臟損傷程度，既提高熱應(yīng)激小鼠血清總蛋白、球蛋白和白蛋白的含量及免疫功能。因此對(duì)富硒女貞子進(jìn)行了抗山羊熱應(yīng)激的研究，通過富硒女貞子安全性試驗(yàn)和抗熱應(yīng)激療效試驗(yàn)，觀察山羊生產(chǎn)性能、血液學(xué)、血清生化指標(biāo)及對(duì)山羊外周血淋巴細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞因子分

2、泌、抗氧化活性的影響，來探索其抗山羊熱應(yīng)激的效果及作用機(jī)制。
　　試驗(yàn)一 富硒女貞子對(duì)山羊的安全性試驗(yàn)
　　旨在研究富硒女貞子對(duì)山羊的用藥安全性。選取30頭成年產(chǎn)奶山羊隨機(jī)均分為5組，其中C組飼喂基礎(chǔ)日糧，CLL組基礎(chǔ)日糧中添加女貞子30g/頭/d，LSLL組、MSLL組、HSLL組基礎(chǔ)日糧中分別添加富硒女貞子10 g/頭/d、30g/頭/d、50g/頭/d，給藥組于試驗(yàn)開始的第5d給藥，連續(xù)5d。經(jīng)產(chǎn)奶量、血液中WBC、R

3、BC、HGB含量、血清中TP、ALB、ALT、AST、CK、LDH的水平測(cè)定。結(jié)果顯示:富硒女貞子和普通女貞子均能提高山羊的產(chǎn)奶量，在試驗(yàn)1～7、22～38 d產(chǎn)奶量增長(zhǎng)率由大到小的排序?yàn)?LSLL組＞MSLL組＞HSLL組＞CLL組＞C組;CLL組能顯著提高山羊RBC(P＜0.05)，MSLL組、CLL組均能顯著提高山羊HGB含量（P＜0.05）;LSLL組、MSLL組、HSLL組和CLL組均能顯著提高山羊血清中TP含量(P＜0.05

4、)，LSLL組、MSLL組和CLL組均能顯著提高山羊血清中ALB含量(P＜0.05)，LSLL組能顯著降低血清中AST活性(P＜0.05);添加富硒女貞子對(duì)山羊WBC含量、ALT、CK、LDH活性均無顯著影響(P＞0.05)。說明日糧中添加富硒女貞子在提高山羊產(chǎn)奶量的同時(shí)，亦提高了血液RBC、HGB和血清TP、ALB的含量，降低了血清AST活性，而對(duì)山羊WBC、ALT、CK、LDH活性影響不明顯，提示基礎(chǔ)日糧中按≤50g/頭/d劑量添加

5、富硒女貞子，連用5d，對(duì)山羊是安全的。
　　試驗(yàn)二 富硒女貞子對(duì)山羊熱應(yīng)激的影響
　　為觀察富硒女貞子對(duì)熱應(yīng)激山羊生產(chǎn)性能、血液學(xué)和血清生化指標(biāo)的影響。選取30頭泌乳期薩能山羊隨機(jī)均分為5組，其中HS組飼喂基礎(chǔ)日糧，CLL組基礎(chǔ)日糧中添加女貞子10g/頭/d，LSLL組、MSLL組、HSLL組基礎(chǔ)日糧中分別添加富硒女貞子5g/頭/d、10g/頭/d、20g/頭/d。試驗(yàn)期為2014年7月10日至8月27日，給藥組于每旬前3天

6、混飼給藥，給藥4批次。經(jīng)產(chǎn)奶量、乳成分、血液中WBC、RBC、HGB含量、血清中TP、ALB、ALT、AST、LDH、IL-2、IFN-γ、IL-6、SOD、GSH-Px、ACTH、COR的水平測(cè)定。結(jié)果顯示:日糧中添加富硒女貞子能提高熱應(yīng)激山羊的產(chǎn)奶量，產(chǎn)奶量下降率由小到大的排序?yàn)?MSLL組＞LSLL組＞HSLL組＞CLL組＞HS組，其中MSLL組較非熱應(yīng)激期增加了2.89％，極顯著高于HS組的下降10.07％(P＜0.01);顯著

7、升高熱應(yīng)激山羊乳脂肪含量(P＜0.05)、提高了乳蛋白含量;明顯提高了血清中TP、ALB含量;28d時(shí)HSLL組的HSP70表達(dá)量、LSLL組的LDH活性顯著低于HS組，LSLL組的IL-2、IFN-γ含量、SOD活性顯著高于HS組（P＜0.05），14d時(shí)MSLL組、HSLL組、CLL組的COR濃度均顯著低于HS組(P＜0.05)，對(duì)乳糖、總?cè)楣腆w、非脂乳固體、WBC、RBC、HGB、ALT、AST、IL-6的影響不明顯(P＞0.05

8、)。表明富硒女貞子對(duì)熱應(yīng)激山羊具有通過調(diào)節(jié)內(nèi)分泌-免疫、改善機(jī)體代謝而提高產(chǎn)奶量的作用，尤以5～10 g/頭/d富硒女貞子的作用效果為佳。
　　試驗(yàn)三 富硒女貞子對(duì)山羊外周血淋巴細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞因子分泌及抗氧化活性的影響
　　分析富硒女貞子對(duì)山羊外周血淋巴細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞因子分泌及抗氧化活性的影響。采用MTT法測(cè)定富硒女貞子多糖、蛋白質(zhì)、齊墩果酸對(duì)山羊外周血淋巴細(xì)胞增殖活性的影響，并且對(duì)其培養(yǎng)上清細(xì)胞因子IL-2、IL-

9、4、IL-6、IFN-γ水平和SOD活性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示:富硒女貞子多糖、蛋白質(zhì)和齊墩果酸體外均具有促進(jìn)ConA刺激山羊外周血淋巴細(xì)胞分裂增殖的作用，且富硒女貞子蛋白質(zhì)組分、齊墩果酸組分的作用效果明顯優(yōu)于普通女貞子組，各相應(yīng)濃度比較差異顯著比例分別達(dá)到63.64％、40.00％;富硒和普通女貞子均極顯著提高外周血淋巴細(xì)胞中SOD的活性(P＜0.01)，且富硒女貞子的作用效果明顯優(yōu)于普通女貞子;富硒女貞子可刺激淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-2，但與

10、對(duì)照組比較差異不顯著(P＞0.05)。結(jié)果表明富硒女貞子多糖、蛋白質(zhì)和齊墩果酸均具有促進(jìn)山羊外周血淋巴細(xì)胞增殖活性的作用，同時(shí)明顯提高其抗氧化能力。
　　結(jié)論:富硒女貞子，按≤50g/頭/d，連用5d，對(duì)山羊具有較好的安全性;能緩解山羊熱應(yīng)激影響導(dǎo)致的產(chǎn)奶量下降（提高了2.89％），以5～10g/頭/d富硒女貞子的作用效果為佳，且作用效果優(yōu)于普通女貞子。其作用機(jī)制是通過HPA軸來調(diào)低熱應(yīng)激性升高的ACTH、COR，調(diào)升熱應(yīng)激降低的