載多西紫杉醇脂質(zhì)微泡制備及對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞抑制作用體外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：原發(fā)性肝癌是危害人類生命健康最常見的惡性腫瘤之一,由于發(fā)病隱匿,惡性程度高,易發(fā)生浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移,發(fā)現(xiàn)時(shí)大多已經(jīng)是中晚期,失去手術(shù)治療的機(jī)會(huì),目前迫切需要尋找到行之有效的治療方法。超聲介導(dǎo)的微泡靶向治療是近年來研究的熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)通過制備載多西紫杉醇脂質(zhì)微泡,并通過體外實(shí)驗(yàn)考察此微泡聯(lián)合超聲對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞的增殖抑制及誘導(dǎo)凋亡作用,探索靶向治療肝癌的可行性和有效性。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)采用磷脂類化合物為膜材料,包裹氣體選擇C3

2、F8,藥物為多西紫杉醇,采用薄膜水化法制備載藥超聲微泡。以包封率為指標(biāo),通過單因素考察磷脂與多西紫杉醇藥物的比例,磷脂與膽固醇的比例、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的溫度、水化的溫度和時(shí)間、機(jī)械震蕩的時(shí)間篩選出最佳制備工藝;掃描電鏡和透射電鏡觀察微泡形態(tài)及檢測(cè)粒徑大小,HPLC法檢測(cè)包封率和載藥量,4℃和25℃條件下考察其穩(wěn)定性,超聲觀察體內(nèi)顯影效果。體外實(shí)驗(yàn)中,采用CCK-8法檢測(cè)多西紫杉醇對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞的生存影響;CCK-8法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組對(duì)細(xì)胞的

3、增殖抑制作用;倒置顯微鏡觀察各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡情況;流式細(xì)胞儀檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)細(xì)胞的周期及凋亡;透射電鏡觀察各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的微結(jié)構(gòu)變化。
　　結(jié)果：載多西紫杉醇脂質(zhì)微泡外形圓整,分散好,無黏連,大小均勻,粒徑范圍在200~650nm之間;包封率為(85.72±2.68)％,載藥量為(14.29±1.17)%;4℃條件下保存10d性質(zhì)穩(wěn)定,其粒徑在230~700nm之間;包封率為(80.25±2.26)%,載藥量為(13.37±1.13)%;

4、體內(nèi)造影中超聲微泡能夠增強(qiáng)顯影效果,增大超聲儀MI微泡能順利被擊碎。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:多西紫杉醇能明顯影響人肝癌HepG2細(xì)胞的生存,且細(xì)胞的存活率與藥物濃度和作用時(shí)間呈量效關(guān)系。載多西紫杉醇脂質(zhì)微泡聯(lián)合超聲對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖抑制和凋亡誘導(dǎo)作用較其他實(shí)驗(yàn)組更顯著。單純使用載多西紫杉醇脂質(zhì)微泡對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞沒有明顯增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用,且此微泡只有在超聲作用下才能導(dǎo)致微泡內(nèi)藥物的釋放。
　　結(jié)論：載多西紫杉醇脂質(zhì)微