索拉非尼聯(lián)合斑蝥酸鈉對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞抑制作用研究.pdf

1、目的:
　　觀察索拉菲尼聯(lián)合斑蝥酸鈉對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞抑制作用的聯(lián)合效應(yīng)及其相關(guān)機(jī)制探索。
　　方法:
　　實(shí)驗(yàn)分為四組，空白組，索拉非尼組，斑蝥酸鈉組及聯(lián)合用藥組，利用CCK-8法分別測(cè)定索拉非尼及斑蝥酸鈉對(duì)HepG2細(xì)胞的半抑制濃度(IC50)，并根據(jù)IC50確定兩藥后述實(shí)驗(yàn)濃度。利用CCK-8法測(cè)定各組不同濃度的抑制率，利用平板克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察各組克隆形成率，采用流式細(xì)胞儀測(cè)定各組的細(xì)胞周期分布情況，采用Cas

2、pase分光光度法測(cè)定各組細(xì)胞液中caspase-3的濃度。利用western blotiug法測(cè)定ERK1/2及p-ERK1/2在各組的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　索拉非尼、斑蝥酸鈉單藥及聯(lián)合用藥時(shí)抑制率都隨藥物濃度的升高及作用時(shí)間的延長(zhǎng)而升高，表現(xiàn)劑量-時(shí)間依賴效應(yīng)，而聯(lián)合用藥組的抑制率則明顯較單藥組高（p＜0.05），并在索拉非尼、斑蝥酸鈉濃度為4+3.88μmol/L的48h時(shí)段可表現(xiàn)協(xié)同作用，其余大多表現(xiàn)為相加作用

3、。藥物濃度越高，克隆形成率越低，具有劑量依賴效應(yīng)，聯(lián)合用藥組則較單藥組更低(p＜0.05)。索拉非尼及斑蝥酸鈉單藥及聯(lián)合用藥時(shí)G1期細(xì)胞占比分別為:64.86±1.44％、60.68±1.48％、69.13±1.85％，明顯高于對(duì)照組的49.89±3.30％(F=45.936，p＜0.001)，而聯(lián)合組的細(xì)胞占比較單藥組更高(p＜0.05);三個(gè)用藥組Casepase-3均有活化，其中聯(lián)合組最強(qiáng);單藥組及聯(lián)合用藥組的ERK表達(dá)較對(duì)照組無(wú)

4、明顯差異(F=2.928，P=0.100)，而對(duì)于p-ERK，索拉非尼組及聯(lián)合用藥組的相對(duì)表達(dá)量為0.3122±0.0180及0.3714±0.0444明顯低于對(duì)照組的0.4694±0.0568(p＜0.05)，斑蝥酸鈉組相對(duì)表達(dá)量0.5718±0.0503，明顯高于對(duì)照組(p=0.023)。
　　結(jié)論:
　　索拉非尼聯(lián)合斑蝥酸鈉對(duì)HepG2的抑制作用表現(xiàn)為協(xié)同效應(yīng)，可雙重阻滯細(xì)胞于G1期。其機(jī)制可能與活化caspase-3