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1、目的:氯化消毒副產(chǎn)物(chlorinated disinfection by-products,CDBPs)在加氯消毒的飲水中普遍存在。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和流行病學(xué)資料表明一些CDBPs具有致突變、致畸和致癌作用,對(duì)人類健康構(gòu)成潛在危害。亟需建立一套合理有效的飲水遺傳毒理學(xué)組合實(shí)驗(yàn)對(duì)飲水的安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)。本文應(yīng)用細(xì)胞毒性試驗(yàn)和胞質(zhì)分裂阻滯法微核試驗(yàn)(cytokinnesis-block micronucleus method,CBMNT)評(píng)價(jià)CD
2、BPs對(duì)HepG2的細(xì)胞毒性和遺傳毒性大小,以此來探討以HepG2為靶細(xì)胞的細(xì)胞毒性試驗(yàn)和CBMNT試驗(yàn)納入到飲水安全評(píng)價(jià)體系的可行性。
方法:
①選取5種健康風(fēng)險(xiǎn)高的CDBPs:二氯乙酸、三氯乙酸、二溴乙酸、二氯乙腈、3-氯-4-(二氯甲基)-5羥基-2(5氫)-呋喃酮(MX),分別用結(jié)晶紫染色法和CBMNT試驗(yàn)評(píng)價(jià)它們對(duì)HepG2細(xì)胞的細(xì)胞毒性和遺傳毒性,評(píng)價(jià)毒性大小,分析細(xì)胞毒性和遺傳毒性之間的聯(lián)系;<
3、br> ②用CBMNT試驗(yàn)檢測(cè)武漢市某水廠水樣氯化消毒前后有機(jī)提取物對(duì)HepG2細(xì)胞的遺傳毒性的變化。
結(jié)果:
①CDBPs的HepG2細(xì)胞72小時(shí)細(xì)胞毒性試驗(yàn)5種CDBPs的HepG2細(xì)胞毒性排序?yàn)镸X>二氯乙腈>二溴乙酸>二氯乙酸>三氯乙酸,其%C?值(單位:mmol/L)分別為:0.090、0.284、1.217、5.067、9.335。
②CDBPs的HepG2細(xì)胞CBMNT試驗(yàn)與
4、溶劑對(duì)照相比,5種CDBPs引起微核率顯著升高的最低濃度分別為MX:100μmol/L、二氯乙腈:200μmol/L、二溴乙酸:500μmol/L、二氯乙酸:1000μmol/L、三氯乙酸:5000μmol/L(P<0.05),結(jié)合C因子(C因子=MN最大值組/MN溶劑對(duì)照組)對(duì)這5種CDBPs的遺傳毒性排序?yàn)椋篗X>二氯乙腈>二溴乙酸>二氯乙酸>三氯乙酸。此排序和細(xì)胞毒性一致。
③武漢市某水廠氯化消毒飲水有機(jī)提取物的He
5、pG2細(xì)胞胞質(zhì)阻滯微核試驗(yàn)與溶劑對(duì)照相比,在各染毒濃度下,該水廠的水源水均未見引起HepG2細(xì)胞的微核率顯著升高(P>0.05),而出廠水和末梢水在最高染毒濃度(150ml/ml培養(yǎng)液)下,誘導(dǎo)的微核率顯著升高(P<0.05)??梢娝此?jīng)過氯化消毒處理后可產(chǎn)生對(duì)HepG2的遺傳毒性。
結(jié)論:本文采用的結(jié)晶紫染色細(xì)胞毒性試驗(yàn)可對(duì)CDBPs的細(xì)胞毒大小進(jìn)行較好評(píng)價(jià);HepG2細(xì)胞的CBMNT試驗(yàn)(CBMNT/HepG2)可檢
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