菲律賓蛤仔糖蛋白的分離純化、理化性質(zhì)及生理活性的初步研究.pdf

1、目的：通過對(duì)菲律賓蛤仔GP結(jié)構(gòu)與性質(zhì)的研究，為其抗腫瘤作用機(jī)理的研究提供一定的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，并綜合利用貝類資源為研究新型的功能性食品提供理論基礎(chǔ)。本文以菲律賓蛤仔全臟器為原料，對(duì)其糖蛋白進(jìn)行了初步研究，探討了菲律賓蛤仔糖蛋白的制備工藝 ，并對(duì)其組成生理活性進(jìn)行了研究。菲律賓蛤仔全臟器經(jīng)熱水煮提、透析、冷凍干燥得到菲律賓蛤仔糖蛋白粗品，粗品經(jīng)DEAE-52-纖維素、Sephadex-G100柱層析分離純化，并經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳對(duì)純化所得的級(jí)

2、分進(jìn)行分析來鑒定其相對(duì)純度較高。 采用改良的MTT法檢測(cè)菲律賓蛤仔糖蛋白對(duì)體外腫瘤細(xì)胞的抑制作用和對(duì)細(xì)胞免疫功能的影響。采用HPLC對(duì)純化的級(jí)分進(jìn)行了單糖組分檢測(cè)，改良的苯酚-硫酸法和Folin-酚法測(cè)總糖、總蛋白質(zhì)的含量，IR確定其特征基團(tuán)，SDS-PAGE法測(cè)定其相對(duì)分子質(zhì)量。 結(jié)果與結(jié)論：⒈本文首次以菲律賓蛤仔全臟器為原料分離提取出菲律賓蛤仔糖蛋白，菲律賓蛤仔糖蛋白經(jīng)DEAE-52-纖維素、Sephadex-G10

3、0柱層析分離純化可得二個(gè)主要組分：中性糖蛋白GP-1，酸性糖蛋白GP-2，經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳分析表明其相對(duì)純度較高。 2. GP-1相對(duì)分子質(zhì)量為35000Da，總糖含量60.5％，蛋白含量18.2％，HPLC糖組成分析表明其糖鏈部分主要是由木糖、葡萄糖、半乳糖組成，IR分析表明其含有多糖的-OH，-COO-1，-NH，-C-O-C等特征基團(tuán)。 3.GP-2相對(duì)分子質(zhì)量為43000Da，總糖含量57.4％,蛋白含量22