復(fù)方兒茶軟膏的制備及藥理作用研究.pdf

1、通過(guò)參閱古醫(yī)藥文獻(xiàn)、現(xiàn)代中藥藥理學(xué)研究和臨床應(yīng)用等資料,選方立藥,并且結(jié)合用藥目的確定給藥方式為局部外用,選定劑型,確定處方。
　　綜合考察處方中各味藥材及其有效成分的理化性質(zhì),通過(guò)評(píng)價(jià)最終滅菌產(chǎn)品的性狀、pH值、主藥含量、無(wú)菌,比較干熱滅菌法、輻射滅菌法和微波滅菌法,最終確定用微波滅菌法,結(jié)合無(wú)菌生產(chǎn)和分裝來(lái)實(shí)現(xiàn)終產(chǎn)品的無(wú)菌。
　　該制劑的顯微鑒別特征不明顯,TLC法鑒別的專(zhuān)屬性強(qiáng),可鑒別出制劑中的兒茶、HU和HS皂苷的有

2、效成分。由于本軟膏是用于深度創(chuàng)傷,和肌肉組織接觸,故對(duì)其pH值也進(jìn)行檢查。依照中國(guó)藥典2005版一部附錄有關(guān)要求,對(duì)實(shí)驗(yàn)室三批制劑進(jìn)行了質(zhì)量分析,包括制劑的性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定等方面,其中含量測(cè)定采用HPLC法,經(jīng)色譜條件摸索和方法學(xué)考察,能精密準(zhǔn)確地測(cè)定出制劑中君藥有效成分含量;鑒別采用TLC法,專(zhuān)屬性強(qiáng),準(zhǔn)確,能夠鑒別出制劑中的兒茶、HS和HU;除按藥典軟膏劑下規(guī)定項(xiàng)目外,增加了pH值檢查;在此基礎(chǔ)上制定了復(fù)方兒茶軟膏的質(zhì)量標(biāo)

3、準(zhǔn);按此質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)中試三批制劑進(jìn)行了質(zhì)量檢查。結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)室制劑和中試制劑的質(zhì)量均符合所制定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。該質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)能有效控制該產(chǎn)品的質(zhì)量。
　　對(duì)中試三批制劑進(jìn)行了穩(wěn)定性考察,包括影響因素試驗(yàn)、30℃加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明溫度對(duì)制劑的穩(wěn)定性有較大影響。提示該制劑的儲(chǔ)存應(yīng)避免高溫,建議為低溫儲(chǔ)存(4℃左右)。
　　按照《化學(xué)藥物刺激性、過(guò)敏性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》,對(duì)豚鼠皮膚給藥,觀察元和軟膏的急性毒性、刺

4、激性和過(guò)敏性。結(jié)果表明,復(fù)方兒茶軟膏按2g/只對(duì)正常豚鼠皮膚及破損皮膚給藥,觀察期內(nèi),未見(jiàn)明顯急性毒性反應(yīng)。多次給藥對(duì)豚鼠正常皮膚無(wú)刺激性,破損皮膚無(wú)刺激反應(yīng)。對(duì)動(dòng)物均不產(chǎn)生局部及全身過(guò)敏反應(yīng)。
　　建立了大鼠背部全層皮膚切除模型,選用EGF作為陽(yáng)性對(duì)照,生理鹽水為陰性對(duì)照,設(shè)計(jì)高、中、低三個(gè)劑量組,從形態(tài)學(xué)、組織學(xué)角度考察復(fù)方兒茶軟膏的藥效。以愈合率,創(chuàng)面組織成纖維細(xì)胞計(jì)數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo),結(jié)果高劑量組和中劑量組與陰性對(duì)照相比,有顯著

5、的差異(P<0.05)。
　　通過(guò)測(cè)定創(chuàng)面新生組織的總蛋白含量、羥脯氨酸含量、SOD活力及MDA含量,對(duì)復(fù)方兒茶軟膏的作用機(jī)制進(jìn)行了初步探討。復(fù)方兒茶軟膏能顯著的增加創(chuàng)面羥脯氨酸的含量,即促進(jìn)膠原的合成。
　　本研究制備出質(zhì)量可控、穩(wěn)定的中藥制劑復(fù)方兒茶軟膏;通過(guò)試驗(yàn)證實(shí)該制劑對(duì)皮膚無(wú)毒性、刺激性和過(guò)敏性,安全可靠;還建立了合適的創(chuàng)傷模型,證明了該制劑促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的作用,并對(duì)作用機(jī)制進(jìn)行了初步探討,為新藥申報(bào)和臨床研究奠定了