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1、目的:該試驗(yàn)采用PCR擴(kuò)增法從金黃色葡萄球菌中擴(kuò)增femA、femB及mecA基因,結(jié)合對(duì)常用β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌藥物的MIC值判斷mecA、femA、femB基因?qū)昴退幮缘挠绊?并檢測(cè)mecA基因陽(yáng)性金黃色葡萄球菌對(duì)常用抗菌藥物的敏感性,為進(jìn)一步探討mecA介導(dǎo)的金黃色葡萄球菌的耐藥機(jī)制及臨床選藥提供依據(jù).方法:標(biāo)本來(lái)自2001年7月~2003年10月大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院收集的81株金黃色葡萄球菌,常規(guī)分離臨床標(biāo)本,經(jīng)凝固酶試驗(yàn)、
2、API系統(tǒng)鑒定為金黃色葡萄球菌.按照2003年版美國(guó)臨床試驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)推薦的瓊脂二倍稀釋法,從中篩選表型耐甲氧西林菌株.將受試的金黃色葡萄球菌行多重PCR擴(kuò)增檢測(cè)mecA、femA、femB基因.采用瓊脂二倍稀釋法測(cè)定所有菌株對(duì)13種抗菌藥物的MIC值,統(tǒng)計(jì)被檢菌株MIC<,50>、MIC<,90>及敏感率,并對(duì)mecA陽(yáng)性、mecA陰性金黃色葡萄球菌對(duì)13種抗生素的藥物敏感實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析.結(jié)論:在該院檢出的81
3、株金黃色葡萄球菌中,表型法MRSA 56.8﹪,PCR基因擴(kuò)增mecA陽(yáng)性金黃色葡萄球菌51.8﹪,表型與基因檢測(cè)符合率84.8﹪,兩種方法無(wú)明顯差異.81株金黃色葡萄球菌輔助基因femA、femB陰性株分別為6株、7株,未發(fā)現(xiàn)femA、femB基因變異菌株.在mecA基因陽(yáng)性42株金黃色葡萄球菌中femA、femB陰性株分別為4株、5株,femA、femB陰性率較低分別為9.5﹪、11.9﹪,對(duì)照大腸桿菌、表皮葡萄球菌未擴(kuò)增出femA
4、、femB基因條帶.femA、femB基因從敏感菌株、低度耐藥到高度耐藥菌株中均有檢出.mecA陽(yáng)性金黃色葡萄球菌對(duì)7種β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的MIC值在femA、femB基因陽(yáng)性菌中明顯高于femA,femB基因陰性菌,femA、femB基因?qū)ecA耐藥表達(dá)可能有協(xié)同作用.在femA、femB基因陽(yáng)性菌中,mecA基因陽(yáng)性金黃色葡萄球菌,未發(fā)現(xiàn)萬(wàn)古霉素耐藥株.mecA陽(yáng)性金黃色葡萄球菌對(duì)萬(wàn)古霉素最為敏感,對(duì)頭孢吡肟、頭孢哌酮/舒巴坦、亞
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