流式細(xì)胞術(shù)檢測血小板微顆粒方法學(xué)探討.pdf

1、[目的]應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)-富含血小板血漿(PRP)法檢測血小板微顆粒(PMPs)，并進(jìn)行方法學(xué)、影響因素探討及臨床意義的評價。 [方法]采用PRP，應(yīng)用血小板特異性熒光抗體CD61-FITC標(biāo)記血小板，并以0.82μm標(biāo)準(zhǔn)微球進(jìn)行定位對照和設(shè)置機(jī)器檢測條件，調(diào)節(jié)機(jī)器閾值，設(shè)門計(jì)數(shù)PMPs占CD61陽性顆粒的百分比。以ADP及膠原誘導(dǎo)血小板活化，計(jì)數(shù)活化以后血小板釋放的PMPs，作為陽性對照，評價該方法的可行性，同時探討了

2、不同抗凝劑抗凝PRP，不同保存時間等對PMPs檢測的影響。 [結(jié)果]檢測30例健康對照者靜息狀態(tài)下血小板釋放的PMPs為2.19％±0.48％，血小板活化后釋放的PMPs數(shù)量顯著增加；ADP活化以后血小板產(chǎn)生的PMPs為5.43％±3.48％，膠原活化以后血小板釋放的PMPs為3.46％±1.14％，提示靜息狀態(tài)和激活后PMPs差異有顯著意義(P＜0.01)。應(yīng)用109mmol/L枸櫞酸鈉和CTAD(枸櫞酸鈉0.11mol/L，

3、茶堿15mmol/L，ERIAAF3.7mmol/L，潘生丁0.198mmol/L)抗凝樣本，檢測結(jié)果顯示CTAD抗凝PRP靜息狀態(tài)下血小板釋放PMPs的量顯著低于枸櫞酸鈉抗凝PRP釋放PMPs量。另外標(biāo)本存放時間對PMPs檢測有較大影響。37例血栓性疾病患者檢測結(jié)果提示血小板釋放的PMPs的量均顯著高于正常對照組(P＜0.01)。 [結(jié)論]采用流式細(xì)胞術(shù)富含血小板血漿法檢測PMPs方法可行，并且其操作簡單、影響因素相對較少，比