小麥耐鹽相關(guān)基因的作圖及克隆.pdf

1、小麥?zhǔn)俏覈牡诙蠹Z食作物，土壤的鹽漬化嚴(yán)重制約著小麥的生產(chǎn)，提高小麥的抗鹽性是小麥的重要育種目標(biāo)之一。本研究通過QTL分析，抗鹽相關(guān)基因的同源序列克隆及功能驗(yàn)證取得了以下結(jié)果： 1.本實(shí)驗(yàn)采用Opata85×W7984 RIL群體及已構(gòu)建的遺傳連鎖圖，用芽期耐鹽指數(shù)，胚根鮮重、干重，胚芽鮮重、干重，苗期鹽害指數(shù)，植株干重、鮮重，根冠比，葉片脯氨酸含量，葉片葉綠素含量等多個(gè)耐鹽相關(guān)生理指標(biāo)，采用QTLmapper1.0軟件對(duì)耐鹽

2、相關(guān)性狀進(jìn)行了QTL定位。 2.吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因是脯氨酸生物合成的限速酶，本研究以耐鹽的中國小麥地方品種茶淀紅為試材，采用同源序列克隆方法，得到了小麥TaP5CS基因，其cDNA長度為2260bp，包含2151bp的ORF，編碼717個(gè)氨基酸，含有ATP、NADPH結(jié)合位點(diǎn)和谷氨酸激酶、谷氨酸脫氫酶保守域，脯氨酸反饋抑制作用位點(diǎn)。 3.以同源序列克隆的方法在cDNA和基因組DNA水平上，獲得了小麥吡

3、咯啉-5-羧酸還原酶(TaP5CR)基因，TaP5CR1基因cDNA全長1025bp，基因組DNA為2600bp,包含7個(gè)外顯子和6個(gè)內(nèi)含子，編碼288個(gè)氨基酸的多肽，GenBank登陸號(hào)為AY880317。Southern雜交的結(jié)果表明，該基因有2個(gè)以上的拷貝。不同六倍體小麥的等位變異分析表明該基因是很保守的。Northernblot分析表明該基因是受鹽脅迫誘導(dǎo)表達(dá)的，在鹽脅迫下表達(dá)增強(qiáng)。小麥TaP5CR基因轉(zhuǎn)化擬南芥，在35S啟動(dòng)子