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1、目的:探討與評(píng)估富含血小板血漿在種植體周骨缺損區(qū)對(duì)骨再生及種植體-骨結(jié)合的影響。 方法:采用Curasan-type PRP Rit兩次離心法,從狗后肢抽靜脈血6ml,以1500r/min轉(zhuǎn)速離心20min,可見血液分三層,最底層是沉降系數(shù)較大的紅細(xì)胞層,最上層是血清,交界處為含血小板的一薄層,吸取上部血漿及靠近交界面下1mm的紅細(xì)胞轉(zhuǎn)到另一試管中,再以2000r/min轉(zhuǎn)速離心10min,可見在底部薄層的紅細(xì)胞上沉積有棕色物質(zhì)
2、,即為血小板沉積層,用巴氏管吸取上部大部分血漿,剩下約0.5ml搖勻即PRP,在PRP加入0.1ml激活劑(1000<'u>牛凝血酶和1ml10%Cacl<,2>溶液混合而成),約3-5分鐘后即成凝膠狀即PRP膠,放在無(wú)菌器皿中備用。在6只成年雜種狗雙側(cè)下頜骨下緣各植入2顆純鈦種植體(共24顆)并在種植體周造成缺損,右下頜2顆為對(duì)照組,在缺損處填入磷酸三鈣和生理鹽水的混合物,左下頜2顆為實(shí)驗(yàn)組,在缺損處填入磷酸三鈣和富血小板血漿的混合物
3、。術(shù)后4、8、12周分別處死兩只狗,先后行X線片觀察、骨密度測(cè)量、電鏡觀測(cè)和組織學(xué)觀察。 結(jié)果:X片觀測(cè)及骨密度測(cè)定:4、8、12周時(shí)均示實(shí)驗(yàn)組骨缺損區(qū)新生骨密度比對(duì)照組高;電鏡觀測(cè):4、8、12周時(shí)均示實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組種植體骨結(jié)合率有顯著性差異,實(shí)驗(yàn)組種植體骨結(jié)合率高;組織學(xué)觀察:實(shí)驗(yàn)組可見大量成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞及新生骨小梁,新生骨組織較成熟,對(duì)照組成骨細(xì)胞少,骨小梁細(xì)而少,纖維組織多見。 結(jié)論:(1)PRP促進(jìn)種植體周骨
4、缺損區(qū)新骨形成。富血小板血漿可釋放多種生長(zhǎng)因子,在刺激成骨細(xì)胞和前成骨細(xì)胞的增殖、抑制破骨細(xì)胞的形成和骨吸收、增加膠原蛋白合成的能力、誘導(dǎo)新生血管形成、為局部骨再生及代謝提供有利的微環(huán)境中單獨(dú)或共同發(fā)揮了作用。基于上述各種生長(zhǎng)因子的生物學(xué)特性及PRP自身的纖維網(wǎng)狀支架作用,賴于環(huán)境中的骨髓干細(xì)胞、OB(osteoblast)等成骨相關(guān)細(xì)胞,具備了組織工程的三要素,經(jīng)過一定時(shí)間后,如實(shí)驗(yàn)結(jié)果所示促進(jìn)骨缺損區(qū)新骨形成。(2)PRP促進(jìn)種植體
5、骨結(jié)合。PRP促進(jìn)種植體骨結(jié)合,這是因?yàn)樵诜N植體骨結(jié)合過程的每一階段都發(fā)揮了它獨(dú)到的作用。在早期種植體表面的細(xì)胞粘附過程中,PRP本身是濃縮的血液,可以充分提供某些蛋白質(zhì)大分子,以便在種植體表面形成穩(wěn)定的蛋白質(zhì)涂層;在種植體表面細(xì)胞的增殖與分化過程中,PRP充分發(fā)揮了誘導(dǎo)作用;在種植體表面形成接觸成骨,與骨組織表面接觸成骨共同形成骨結(jié)合(3)PRP縮短了種植體骨結(jié)合時(shí)間。由于PRP明顯促進(jìn)種植體周骨缺損區(qū)新骨形成、促進(jìn)種植體骨結(jié)合,因而
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