遺傳性垂體性尿崩癥病因及致病機理的研究.pdf

1、背景：常染色體顯性遺傳性垂體性尿崩癥 (Autosomal Dominant eurohypophyseal Diabetes Insipidus, ADNDI) 是精氨酸加壓素 (Arginine vasopressin, AVP) 分泌原發(fā)缺陷的遺傳性疾病。其典型的臨床表現(xiàn)為幼年開始的不同程度的漸進性的口渴、多飲、多尿等臨床癥狀?；颊哐寰彼峒訅核?AVP)水平降低或者缺如，對外源AVP有效。 常染色體顯性遺傳性垂體性尿

2、崩癥（ADNDI）是一種罕見的遺傳性疾病。1990年Repaske等運用RFLP連鎖分析將ADNDI的致病基因定位于20p13的AVP-NP Ⅱ前體及其周圍基因。ADNDI的致病基因位于20號染色體的精氨酸加壓素前體基因(AVP-NP Ⅱ)，該基因共有3個外顯子，編碼產(chǎn)物包括一個信號肽、AVP、神經(jīng)運載素(NP Ⅱ)和一段未知功能的糖基肽，其中NP Ⅱ是AVP的運輸?shù)鞍?。截至目前文獻報道的導致ADNDI的AVP-NP Ⅱ基因突變位點共有

3、40個，涉及整個AVP-NP Ⅱ的前體蛋白（信號肽、AVP和NP Ⅱ），推測突變位點的改變將導致氨基酸序列的變化，從而影響蛋白的正常加工、運輸過程，異常蛋白的堆積產(chǎn)生細胞毒性作用，分泌神經(jīng)元的功能和數(shù)量減少，導致尿崩癥。但AVP－NP Ⅱ基因突變表現(xiàn)型的多樣性是ADNDI研究中始終沒有解決的問題，同樣的突變位點可以具有不同的臨床表型，而同樣的臨床表型可以由不同的突變位點所引起。 本研究在二例遺傳家系，臨床確診為ADNDI，針對

4、AVP-NP Ⅱ前體基因的3個外顯子進行PCR擴增測序，力求找到該家系的致病基因突變位點，以進行必要的基因診斷和及時給予治療。 目的：尋找中國人常染色體顯性遺傳性垂體性尿崩癥 (autosomal dominant neurohypophyseal diabetes insipidus, ADNDI) 的致病基因及基因突變位點。 方法：采集ADNDI家系，在臨床確診的ADNDI家系，提取外周血的基因組DNA，亞克隆測

5、序確認突變位點。采用微衛(wèi)星標記（STR）連鎖分析患者表型中與精氨酸加壓素-神經(jīng)載體Ⅱ（AVP-NP Ⅱ）基因位點, PCR擴增測序AVP-NP Ⅱ基因的三個外顯子。 結果：一例家系中所有患者在AVP-NP Ⅱ基因2號外顯子的1824—1829位AGGAGG存在一個AGG密碼子的缺失，而其他表型正常的成員測序結果正常。另一例家系連鎖分析發(fā)現(xiàn)AVP-NP Ⅱ基因位點與該家系尿崩表型連鎖。但對AVP-NP Ⅱ基因的三個外顯子和啟動子

6、區(qū)域進行PCR擴增及測序，未發(fā)現(xiàn)任何基因突變。連鎖分析結果顯示，該家系表型與第20號染色體（D20p13）上７cM范圍（D20S119和D20S849之間）連鎖，AVP-NP Ⅱ基因位點與ADNDI表型連鎖，但PCR產(chǎn)物直接測序未發(fā)現(xiàn)任何堿基的改變。提示ADNDI存在除AVP-NP Ⅱ基因之外的致病基因。 結論： （1）AVP-NP Ⅱ基因1824-1829位AGGAGG中的一個AGG的缺失導致NP Ⅱ第47位谷氨酸(