復(fù)方銀杏葉膠囊配伍合理性研究.pdf

1、近年來高脂血癥發(fā)病率愈見升高，高甘油三酯血癥作為高脂血癥構(gòu)成中最常見的類型已被愈來愈多的人重視，目前降甘油三酯(TG)藥物首選貝特類，但此類藥物易引起轉(zhuǎn)氨酶升高、腹瀉、急性肝損傷等諸多不良反應(yīng)，而國內(nèi)外研究早已發(fā)現(xiàn)銀杏葉制劑有較佳的降TG作用，但其中含有毒性物質(zhì)銀杏酸(GA)，口服偶見有惡心、嘔吐等胃腸道不良反應(yīng)或過敏反應(yīng)，市場缺少安全有效的降TG藥物，在此基礎(chǔ)上，我們以健脾益氣、活血化瘀中醫(yī)理論為指導(dǎo)，選擇具有健脾消食、保肝的刺梨(C

2、L)與銀杏葉提取物(GbE)配伍研制了復(fù)方銀杏葉膠囊(CGB)，應(yīng)用于高脂血癥等老年性疾病的預(yù)防和治療，可能較單味GbE制劑及貝特類藥物更為安全，同時(shí)兼有整體調(diào)理健康的優(yōu)勢，為探討本品是否具有新藥開發(fā)前景，本文就CGB中GbE與CL配伍的合理性展開研究。
　　 在優(yōu)選配伍比例前，我們首先進(jìn)行了原料篩選。作為國際公認(rèn)的GbE標(biāo)準(zhǔn)，為總黃酮>24％，總內(nèi)酯>6％，同時(shí)限定GA水平在5ppm以下。本文分別以有效成分銀杏黃酮和毒性成分G

3、A為指標(biāo)，比較了多家企業(yè)的GbE原料質(zhì)量，結(jié)果顯示多數(shù)原料中銀杏黃酮含量偏低，有的以添加槲皮素或蘆丁充斥銀杏黃酮。而GA含量則普遍偏高，差異較大。經(jīng)篩選多家原料后，選擇銀杏黃酮含量為25.07％，GA<5ppm的某公司GbE為本復(fù)方銀杏葉膠囊生產(chǎn)用原料。同時(shí)試驗(yàn)中也采用了高銀杏酸含量的原料，用以觀察比較刺梨與GbE配伍后其中GA含量的變化。對CL原料的選擇，則采用Vc含量為指標(biāo)，進(jìn)行了不同工藝刺梨汁粉中Vc含量分析，確定Vc含量為576

4、1.39mg/100g的3號工藝刺梨汁粉為研究及生產(chǎn)用原料。
　　 為考察刺梨與銀杏葉配伍是否有利于提高制劑的安全性，采用譜效結(jié)合研究方法，分別比較了不同比例的刺梨與GbE配伍后對小鼠急性毒性以及GA含量的影響，結(jié)果顯示，GbE與CL配伍后能降低小鼠急性毒性，表現(xiàn)為動物死亡率的下降和死亡時(shí)間的延長，且與CL和GbE配伍后GbE中GA含量降低趨勢相一致。而且采用GA對照品與不同比例鮮刺梨汁混合，進(jìn)行了GA含量變化分析，結(jié)果顯示出G

5、A含量降低的同樣趨勢。研究中還發(fā)現(xiàn)，GA含量變化與溶液PH值有一定的相關(guān)性，是否因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)建立的分析方法對過高銀杏酸含量的GbE中GA萃取效率有限，還是因GA含量高低不同，溶液本身的PH值不同而影響GA以分子或離子形式存在有關(guān)，正在進(jìn)一步研究中。此外，進(jìn)行了不同比例刺梨與GbE配伍后，有效成分銀杏黃酮的含量變化分析，結(jié)果配伍前后各組含量RSD為1.24％，無顯著性差異，因此，認(rèn)為兩者配伍對銀杏黃酮并無影響。
　　 為探討本品降脂

6、作用的最佳配伍比例，本文觀察了不同比例CL與GbE配伍后對高脂模型小鼠的降脂作用，結(jié)果顯示，單、復(fù)方GbE制劑均能顯著降低高脂小鼠血清TG水平，升高血清HDL-c，其中GbE與CL配比為1：0.5和1：1時(shí)還能降低血清炎癥因子CRP，CL與GbE1:0.5配比還能顯著升高高脂小鼠血清SOD(P<0.01)。期間觀察了模型小鼠的黑便排出時(shí)間與排便量，結(jié)果為復(fù)方各配比組均能縮短高脂小鼠排黑便時(shí)間，顯著增加小鼠7h內(nèi)排便總重。對CGB的高脂模

7、型大鼠調(diào)脂作用研究結(jié)果顯示，CGB能明顯降低高脂大鼠血清TG、TC、LDL-c，增加動物高脂飼料攝入量，效果優(yōu)于單方GbE及陽性藥物力平之，提示，CGB降脂的同時(shí)可改善胃腸消化功能。此外，研究顯示復(fù)方配比為1：0.5和1:1時(shí)還能提高小鼠機(jī)體耐缺氧能力(P<0.05)。
　　 在CGB調(diào)脂作用初步研究基礎(chǔ)上，本文還觀察了CGB的肝臟保護(hù)作用。采用MTT法測定CGB含藥血清及復(fù)方不同比例配伍直接給藥對人肝L-02細(xì)胞增殖的影響，結(jié)

8、果顯示CGB含藥血清的促進(jìn)肝L-02細(xì)胞增殖作用顯著強(qiáng)于單方GbE(P<0.05)。同時(shí)采用免疫性肝損傷實(shí)驗(yàn)方法，比較了單、復(fù)方銀杏葉制劑的肝臟保護(hù)作用，結(jié)果可見，CGB能對抗異種抗原引起的大鼠肝臟氧化性損傷，降低血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、總膽紅素水平，且復(fù)方GbE的肝臟保護(hù)作用優(yōu)于單味銀杏葉提取物。
　　 針對健脾益氣的組方原理，采用脾虛模型小鼠進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，通過抗疲勞實(shí)驗(yàn)、小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)觀察了C