水溶性酵母葡聚糖口服液的研究.pdf

1、酵母菌含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)和生物活性物質(zhì)，在酵母菌中，發(fā)揮免疫活性的物質(zhì)是酵母菌細(xì)胞壁中的葡聚糖，其還具有抗病毒、抗腫瘤、抗氧化等生物活性。本文通過對酵母菌進(jìn)行提取工藝和分子修飾工藝的篩選，制備出9個(gè)的硫酸化酵母葡聚糖（sGSC），通過體內(nèi)、體外活性的篩選，得到活性較好葡聚糖，然后將其制備成口服液并進(jìn)行穩(wěn)定性的研究，全文的結(jié)論如下：
　　1.通過預(yù)實(shí)驗(yàn)，選出了鹽析法與堿法結(jié)合的提取方法，以糖含量為實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，對鹽溶液的濃度（A）、反應(yīng)

2、時(shí)間（B）和溫度（C）三因素進(jìn)行了L9（34）正交設(shè)計(jì)，通過直觀分析得出RA＞RB＞RC＞R；在方差分析中，F(xiàn)A，F(xiàn)C均大于F0.95（2,2），表明因子A與因子C在顯著性水平0.05上差異顯著； FB＜F0.90（2,2），表明因子 B差異不顯著。因此，選擇酵母葡聚糖的最佳提取工藝組合為A3B3C1。
　　2.以濃硫酸的濃度和反應(yīng)時(shí)間為影響因素進(jìn)行兩因素的試驗(yàn)，制備了9個(gè)sGSC，在DPPH和羥自由基的清除實(shí)驗(yàn)中，隨著葡聚糖濃度

3、的增加，自由基的清除率逐漸增加，最高分別達(dá)到92.52％和83.41%，其中對DPPH自由基的清除率順序依次為7＞6＞9＞2＞8＞5＞1＞3＞4；對羥自由基的清除活性依次為6＞7＞9＞2＞3＞4＞5＞1。在超氧化物自由基的清除實(shí)驗(yàn)中，各產(chǎn)物的清除率均偏低，且清除率與葡聚糖濃度沒有明顯的線性關(guān)系，初步篩選出三個(gè)抗氧化活性較好的產(chǎn)物。
　　3.將三個(gè) sGSC進(jìn)行體內(nèi)抗氧化及免疫增強(qiáng)活性評價(jià)，并研究其活性與分子量和取代度之間的關(guān)系。在

4、體內(nèi)抗氧化實(shí)驗(yàn)中，各實(shí)驗(yàn)組的超氧化物歧化酶（SOD）活性與對照組并沒有顯著差異（p＞0.05）；sGSC1組的谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）活性顯著高于對照組（p＜0.05）；sGSC1和sGSC2組的過氧化氫酶（CAT）活性顯著高于sGSC3組和對照組（p＜0.05）；三個(gè)sGSC組的丙二醛（MDA）活性明顯低于對照組（p＜0.05）?？寡趸钚皂樞?yàn)閟GSC1＞sGSC2＞sGSC3，sGSC1，sGSC2和sGSC3的取代度和

5、分子量分別為0.16，12.9kDa；0.24，16.5kDa和0.27，19.2kDa。表明隨著分子量和取代度的增加，其抗氧化活性逐漸降低。在免疫增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)中，各實(shí)驗(yàn)組的脾臟和胸腺臟器指數(shù)與對照組差異顯著（p＜0.05）；在淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)中， sGSC1和sGSC2組的A570值顯著高于其他組（p＜0.05），與對照組相比，三個(gè)sGSC組的CD4+細(xì)胞數(shù)顯著升高，CD8+細(xì)胞數(shù)顯著降低，兩種細(xì)胞的比率顯著升高（p＜0.05）；三個(gè)sG

6、SC組的IL-2和IFN-γ濃度顯著高于對照組（p＜0.05）。綜合結(jié)果比較低分子量和取代度的sGSC1的免疫增強(qiáng)結(jié)果最好。
　　4.制備三批口服液樣品，通過光照實(shí)驗(yàn)和加速實(shí)驗(yàn)對樣品進(jìn)行穩(wěn)定性評價(jià)，在光照實(shí)驗(yàn)中，在第5天和第10天時(shí)三批樣品的糖含量均比第0天的值偏小，表明該口服液對光照不穩(wěn)定。在加速實(shí)驗(yàn)中，三批樣品的的各項(xiàng)指標(biāo)在第0、1、2、3和6個(gè)月之間沒有顯著的變化，表明制備的葡聚糖口服液樣品具有較好的穩(wěn)定性。
　　綜上