孕酮對(duì)卵巢去勢(shì)大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用.pdf

1、目的：婦女在絕經(jīng)期后，激素喪失會(huì)使認(rèn)知能力減退，有研究提示激素替代治療(HRT)能減少癡呆發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)，改善腦部功能退化、延緩或預(yù)防AD的發(fā)生。雌激素和孕酮的保護(hù)作用已被廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。本研究的目的是探討孕酮?duì)卵巢去勢(shì)(OVX)大鼠學(xué)習(xí)記憶的作用及其機(jī)制。
　　 方法：3月齡健康雌性SD大鼠60只。隨機(jī)分為六組：正常組、卵切組、卵切+孕酮組、卵切+芝麻油組、假手術(shù)+孕酮組及假手術(shù)+芝麻油組。孕酮組皮下注射孕酮20mg/kg、

2、芝麻油組皮下注射等體積的無(wú)菌芝麻油；以后每7天給藥1次，共4次。給藥3周后采用Morris水迷宮進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶能力檢測(cè)，用免疫組化和WesternBlot方法檢測(cè)caspase-3、Bcl-2、5-HT-2A、GFAP和NF-κBp65蛋白在海馬神經(jīng)元中的表達(dá)水平，同時(shí)，用透射電鏡和TUNEL分別觀察大鼠腦中海馬神經(jīng)細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)和細(xì)胞凋亡情況。
　　 結(jié)果：1.Morris水迷宮潛伏期結(jié)果顯示，卵巢切除去勢(shì)后逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)(

3、P<0.01)、平臺(tái)次數(shù)明顯減少(P<0.01)，外源性孕酮使逃避學(xué)習(xí)成績(jī)明顯提高(P<0.01)、找到平臺(tái)的次數(shù)稍有改善(P<0.05)。
　　 2.免疫組織化學(xué)結(jié)果可見(jiàn)，正常組、卵切+孕酮組和假手術(shù)組的GFAP免疫反應(yīng)強(qiáng)度比卵切組、卵切+芝麻油組弱(P<0.01)，免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)少于卵切組，卵切+芝麻油治療組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。正常組、卵切+孕酮組和假手術(shù)組的Caspase-3免疫反應(yīng)強(qiáng)度比卵切組，卵切+芝麻油治療組弱(P<

4、0.01)。正常組、卵切+孕酮治療組和假手術(shù)組的5-HT-2A免疫反應(yīng)強(qiáng)度比卵切組，卵切+芝麻油治療組強(qiáng)(P<0.01)。正常組、卵切+孕酮治療組和假手術(shù)組的Bcl-2免疫反應(yīng)強(qiáng)度比卵切組、卵切+芝麻油治療組強(qiáng)(P<0.05)。正常組、卵切+孕酮治療組和假手術(shù)組的NFkBp65免疫反應(yīng)強(qiáng)度比卵切組，卵切+芝麻油治療組弱(P<0.01)。
　　 3.western結(jié)果顯示，卵切組與正常組相比，GFAP灰度值較高(p=0.013)，

5、卵切+孕酮組與卵切組比較，灰度值明顯低(p=0.012)。卵切組與正常組比較，Bcl-2的灰度值明顯低(p=0.000)，卵切+孕酮組與卵切組、卵切+芝麻油組比較，灰度值明顯強(qiáng)，分別p=0.000和0.000。卵切組與正常組比較，caspase-3的灰度值明顯高(p=0.000)，卵切+孕酮組與卵切組、卵切+芝麻油組比較，灰度值明顯低，分別p=0.001和0.016。卵切組與正常組比較，5-H-2A的灰度值明顯低(p=0.000)，卵切

6、+孕酮組與卵切組、卵切+芝麻油組比較，灰度值明顯強(qiáng)，分別p=0.000和0.000。卵切組與正常組比較，NFkBp65的灰度值明顯高(p=0.009)，卵切+孕酮組與卵切組比較，灰度值低(p=0.002)。
　　 4.TUNEL染色顯示卵切+孕酮，假手術(shù)組的凋亡細(xì)胞比卵切組明顯少(p<0.01)。
　　 5.電鏡結(jié)果顯示：
　　 正常組，非卵切+孕酮組和非卵切+芝麻油組：突觸數(shù)量比較多，結(jié)構(gòu)清晰(突觸前膜和突觸后

7、膜清晰，兩膜之間有明顯的突觸裂即突觸間隙)，突觸后膜有致密的電子物質(zhì)，還可見(jiàn)很多線粒體，并且細(xì)胞器結(jié)構(gòu)完整。卵切組和卵切+芝麻油組：可見(jiàn)突觸部分變性，數(shù)目減少，突觸間隙增厚，突觸后膜致密物質(zhì)變?nèi)酰?xì)胞器變形，突觸前終末內(nèi)線粒體混濁腫脹。卵切+孕酮組，突觸后膜的致密電子物質(zhì)增強(qiáng)，細(xì)胞器完整。
　　 結(jié)論：孕酮能明顯縮短潛伏期，增強(qiáng)空間探索能力，降低GFAP、caspase-3和NFkBp65，升高Bcl-2、5-HT-2A在大鼠海