IL-32γ對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞增殖及分泌的影響.pdf

1、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種常見(jiàn)且致殘率極高的嚴(yán)重危害人類身心健康的系統(tǒng)性自身免疫性疾病。其病理上的特征表現(xiàn)為滑膜細(xì)胞的“腫瘤樣”增生、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、血管翳的形成以及關(guān)節(jié)軟骨和骨的進(jìn)行性破壞。RA的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，涉及多種細(xì)胞、多個(gè)細(xì)胞因子以及多條信號(hào)通路之間的相互作用，盡管人類在過(guò)去的數(shù)十余年里對(duì)RA的病理生理進(jìn)行了廣泛而深入的研究，也取得了突破性的進(jìn)展，但其發(fā)病機(jī)制至今尚不完全清楚。因而有

2、必要對(duì)RA的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行更深一步的研究與探索，尋找到更多新的可能的治療靶標(biāo)。
　　 白細(xì)胞介素-32（interleukin-32，IL-32）是新發(fā)現(xiàn)的一種存在六種或更多剪接變異體的炎性細(xì)胞因子。研究發(fā)現(xiàn)，IL-32高表達(dá)于RA滑膜的活組織檢測(cè)中，而在骨關(guān)節(jié)炎的滑膜組織中沒(méi)有檢測(cè)到IL-32的表達(dá)。IL-32可通過(guò)多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，促進(jìn)細(xì)胞分化，參與細(xì)胞凋亡，誘導(dǎo)其他致炎細(xì)胞因子和趨化因子的生成，在炎癥反應(yīng)、心血管疾病和自身免

3、疫性疾病等方面發(fā)揮著重要作用。IL-32γ是最長(zhǎng)的剪接變異體，且表現(xiàn)出最強(qiáng)的生物活性。本研究通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)，探究IL-32γ對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞（RA-FLS）的增殖和分泌的影響以及其信號(hào)調(diào)節(jié)途徑。通過(guò)MTT的方法發(fā)現(xiàn)了IL-32γ促進(jìn)RA-FLS增殖的最佳濃度為100ng/ml。通過(guò)細(xì)胞免疫組化的方法發(fā)現(xiàn)IL-32γ是通過(guò)NF-κB信號(hào)通路來(lái)促進(jìn)FLS 增殖。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)IL-32γ對(duì)RA-FLS 增殖的細(xì)胞周期的影響

4、，發(fā)現(xiàn)它是通過(guò)促進(jìn)S期向G2期轉(zhuǎn)換來(lái)促進(jìn)細(xì)胞增殖的。用RT-PCR的方法檢測(cè)了在培養(yǎng)基中加入了IL-32γ刺激后對(duì)RA-FLS中IL-6表達(dá)量的影響，用同樣的方法檢測(cè)了在分別加入SB203580（p38MAPK 抑制劑）、SP600125（JNK 抑制劑）、PD98059（Erk1/2 抑制劑）三種MAPKs 信號(hào)通路的抑制劑30min后再在培養(yǎng)基中加入IL-32γ刺激后對(duì)RA-FLS中IL-6表達(dá)量的影響，結(jié)果表明IL-32γ可以促進(jìn)