UrotensinⅡ?qū)Ψ伟┭装Y微環(huán)境的調(diào)控作用及機(jī)制.pdf

1、第一部分：UrotensinⅡ?qū)闪雎闶笃は乱浦擦錾L(zhǎng)的影響
　　目的：觀察移植瘤的體積和重量，研究UⅡ?qū)闪雎闶笃は乱浦擦錾L(zhǎng)的影響。
　　方法：將非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞接種于裸鼠皮下建立移植瘤模型，待移植瘤平均直徑達(dá)到4mm后隨機(jī)分為四組：對(duì)照組、UⅡ組(40μg/kg)、DDP組(25mg/kg)、DDP+UⅡ組(DDP25mg/kg和UⅡ40μg/kg)，每周給予相應(yīng)的藥物兩次，連續(xù)給藥7周。每周測(cè)量移植瘤體積，繪

2、制各組裸鼠移植瘤生長(zhǎng)曲線。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取出移植瘤稱重。
　　結(jié)果：1.所有接種肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549的裸鼠均成瘤。2.與對(duì)照組相比，UⅡ組裸鼠移植瘤生長(zhǎng)曲線更加陡直，而DDP組裸鼠移植瘤生長(zhǎng)曲線平緩；與DDP組相比，DDP+UⅡ組裸鼠移植瘤生長(zhǎng)曲線較陡直。3.與對(duì)照組相比，UⅡ組裸鼠移植瘤重量顯著增大(P<0.05)，而DDP組裸鼠移植瘤重量顯著減小(P<0.01)；DDP+UⅡ組裸鼠移植瘤重量雖比DDP組移植瘤大，但兩組移植瘤重量差別

3、無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：UⅡ能明顯促進(jìn)荷瘤裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)。
　　第二部分：UrotensinⅡ?qū)Ψ伟┭装Y微環(huán)境的影響及機(jī)制
　　目的：觀察UⅡ?qū)Ψ伟┙M織中腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs)浸潤(rùn)及炎癥因子表達(dá)水平的影響及UⅡ?qū)F-κB活化的影響，初步探討UⅡ?qū)Ψ伟┭装Y微環(huán)境的影響及機(jī)制。
　　方法：1.免疫組織化學(xué)染色技術(shù)(IHC)檢測(cè)腫瘤組織中CD68+TAMs浸潤(rùn)情況。2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(EL

4、ISA)法檢測(cè)IL-6、TNF-α、MMP-9在腫瘤組織中的表達(dá)水平。3.Western blot法檢測(cè)各組腫瘤組織中p-NF-κB和NF-κB的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.IHC檢測(cè)結(jié)果顯示，CD68陽性染色呈棕黃色，主要表達(dá)于細(xì)胞漿中，與對(duì)照組相比，UⅡ組陽性染色明顯增強(qiáng)，而對(duì)照組陽性染色明顯減弱；而與DDP組相比，DDP+UⅡ組陽性染色較強(qiáng)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，與對(duì)照組相比，UⅡ組CD68的積分光密度(IOD)值顯著增高(P<0.01

5、)，DDP組則顯著降低(P<0.01)；與DDP組相比，DDP+UⅡ組IOD值明顯增高(P<0.01)。2.ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，UⅡ組IL-6、MMP-9和TNF-α的水平顯著升高(P<0.05)；而DDP組IL-6、MMP-9和TNF-α的表達(dá)水平與對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3.Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示，各組間NF-κB的表達(dá)水平?jīng)]有明顯差異。但與對(duì)照組相比，UⅡ組p-NF-κB表達(dá)水平

6、明顯升高(P<0.05)，DDP組p-NF-κB的表達(dá)水平則顯著降低(P<0.01)。與DDP組相比，DDP+UⅡ組p-NF-κB的表達(dá)水平明顯升高(P<0.01)。
　　結(jié)論：1.UⅡ可增加肺癌組織中浸潤(rùn)的TAMs的數(shù)量，誘導(dǎo)IL-6、TNF-α、MMP-9等炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，提示UⅡ能夠促進(jìn)肺癌炎癥微環(huán)境的形成。2。UⅡ能促進(jìn)NF-κB的活化，這可能是其誘導(dǎo)下游炎癥分子IL-6、TNF-α等的表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)肺癌進(jìn)展的機(jī)制之一