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文檔簡介
1、目的:觀察大鼠急性創(chuàng)傷性腦損傷(Traumaticbraininjury,TBI)后重組人促紅細(xì)胞生成素(rhEPO)對創(chuàng)傷腦組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)和水通道蛋白-4(AQP-4)表達的影響,探討其神經(jīng)保護作用機制。
方法:健康雄性SD大鼠55只,體重250-350g,隨機分為假手術(shù)組(n=5)、對照組(n=25)和Epo治療組(n=25);對照組和治療組采用改進的Feeney等人的方法制作腦創(chuàng)傷模型,假手術(shù)
2、組僅切開頭皮,開骨窗,不造成腦損傷。rhEPO治療組在模型建立后立即腹腔注射rhEPO5000U/kg,對照組和假手術(shù)組在等時間點給予等量生理鹽水。根據(jù)傷后處死時間點不同每組再分為5個亞組,即6h、24h、48h、3d、7d組,每個亞組5只動物。
模型制作成功后,先行神經(jīng)功能評分,分別于術(shù)后6h、24h、48h、3d、7d,用10%水合氯醛過度麻醉,斷頭、取腦,行HE染色和免疫組織化學(xué)方法檢測大腦皮層損傷處組織中基質(zhì)金屬蛋
3、白酶-9(MMP-9)及水通道蛋白-4(AQP-4)的表達。
結(jié)果:
1.神經(jīng)行為評定:大鼠在顱腦損傷后立即出現(xiàn)前肢抱握屈曲、后肢強直、肌張力增高、不能直走、向一側(cè)打轉(zhuǎn)等表現(xiàn)。清醒后精神萎靡不振,活動減少。術(shù)后神經(jīng)功能評分均在7~12分之間。
2.組織學(xué)觀察:傷后6h可見神經(jīng)元細(xì)胞腫脹。48h神經(jīng)細(xì)胞周圍可見空隙,核固縮。暗細(xì)胞出現(xiàn)增多,72h神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和組織間隙水腫明顯,傷后7d水腫基本減退
4、,膠質(zhì)細(xì)胞仍增生明顯。假手術(shù)組無明顯變化。
3.免疫組織化學(xué):腦創(chuàng)傷大鼠6h(51.82±4.62)創(chuàng)傷灶腦組織出現(xiàn)MMP-9的表達,隨著損傷時間的延長其表達明顯增強48h(83.51±9.61)達最高,與假手術(shù)組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。AQP-4的表達在6h(42.18±12.78)出現(xiàn)增高,24h(55.28±9.88)達最高,與假手術(shù)組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Epo治療組和對照組相比較
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