COPD模型大鼠體內(nèi)IGF-1表達(dá)與細(xì)胞凋亡關(guān)系的研究.pdf

1、目的：研究慢性阻塞性肺疾病模型大鼠骨骼肌以及血清中IGF-1的表達(dá)、骨骼肌細(xì)胞中細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2，Bax，Caspase-3的表達(dá)，并探討是否由于COPDD大鼠體內(nèi)IGF-1表達(dá)降低，影響B(tài)cl-2/Bax的比值，從而激活Caspase-3蛋白，產(chǎn)生細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)，最終導(dǎo)致骨骼肌萎縮。
　　 方法：70只健康Wistar大鼠，分為COPD模型35只，正常對(duì)照組35只。其中COPD模型組在第1-14天、第16-104天

2、放入自制的染毒箱內(nèi)熏煙，第15天在氣管內(nèi)注射胰蛋白酶(PPE)造COPD大鼠模型。正常對(duì)照組大鼠被飼養(yǎng)在無(wú)香煙煙霧污染的飼養(yǎng)房?jī)?nèi)，除了第15天在氣管內(nèi)注射生理鹽水外，飼養(yǎng)期間不做任何處理。兩組大鼠同時(shí)飼養(yǎng)至第104天。第104天取大鼠的肺組織以及趾長(zhǎng)伸肌，其中一側(cè)趾長(zhǎng)伸肌制成石蠟切片，另一側(cè)趾長(zhǎng)伸肌放入-80℃冰箱中;取大鼠動(dòng)脈血提取血清;測(cè)量各組大鼠的體重以及趾長(zhǎng)伸肌的重量。采用HE染色法觀察兩組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)的改變，免疫組織化學(xué)法測(cè)

3、定趾長(zhǎng)伸肌的IGF-1，Bcl-2，Bax，Caspase-3的表達(dá)。并采用ELISA（酶聯(lián)免疫分析法）測(cè)定血清中IGF-1的表達(dá)。用Image-Pro Plus Version6.0圖像處理系統(tǒng)測(cè)定免疫組化強(qiáng)度，Werstern-Blot法測(cè)定趾長(zhǎng)伸肌Caspase-3活性蛋白表達(dá)。所得數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS17.0軟件做單因素的方差分析、t檢驗(yàn)以及相關(guān)性分析。
　　 結(jié)果：⑴COPD模型組大鼠的氣管壁以及肺組織均有大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，

4、通過(guò)進(jìn)行大鼠肺功能測(cè)量，以及觀察肺組織的病理切片，判定COPD模型組大鼠肺符合COPD診斷標(biāo)準(zhǔn)。⑵COPD模型組大鼠體重以及一側(cè)趾長(zhǎng)伸肌的重量較正常對(duì)照組均有明顯減輕(P＜0.05，P＜0.05)。⑶COPD模型組大鼠血清以及趾長(zhǎng)伸肌中IGF-1表達(dá)明顯低于正常對(duì)照組大鼠(P＜0.05，P＜0.05)。⑷正常對(duì)照組大鼠趾長(zhǎng)伸肌中Bcl-2的表達(dá)明顯強(qiáng)于COPD模型組大鼠(P＜0.05，P＜0.05)。⑸COPD模型組大鼠趾長(zhǎng)伸肌中Bax

5、以及Caspase-3的表達(dá)明顯強(qiáng)于對(duì)照組大鼠(P＜0.05，P＜0.05)。⑹各組大鼠血清以及趾長(zhǎng)伸肌IGF-1的表達(dá)與Bcl-2/Bax的表達(dá)相關(guān)性分析呈正相關(guān)(P＜0.05)。⑺各組大鼠血清以及趾長(zhǎng)伸肌肉IGF-1的表達(dá)與Caspse-3的表達(dá)相關(guān)性分析呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：①.COPD模型血清以及骨骼肌IGF-1表達(dá)均明顯減少。②骨骼肌細(xì)胞凋亡率增加可能是COPD模型大鼠骨骼肌萎縮的重要機(jī)制。③COPD