ER、PR及HER-2-neu在乳腺癌原發(fā)灶與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的對(duì)比分析.pdf

1、背景與目的：乳腺癌內(nèi)分泌治療及分子靶向治療的基礎(chǔ)是雌激素受體(EstrogenReceptor，ER)、孕激素受體(ProgesteroneReceptor，PR)陽(yáng)性表達(dá)以及人類表皮生長(zhǎng)因子受體2（Epithelial growth factor receptor，HER-2/neu）基因擴(kuò)增。目前臨床多數(shù)采用原發(fā)灶手術(shù)切除標(biāo)本或粗針穿刺標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)以指導(dǎo)治療，忽略了原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶間可能存在的異質(zhì)性。本實(shí)驗(yàn)對(duì)比分析進(jìn)展期乳腺癌原發(fā)灶與

2、同期腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶間ER、PR蛋白表達(dá)及HER-2/neu基因狀態(tài)，探討進(jìn)展期乳腺癌ER、PR蛋白表達(dá)及HER-2/neu基因狀態(tài)的穩(wěn)定性，指導(dǎo)臨床檢測(cè)的標(biāo)本選擇。
　　方法：篩選2008年1月到2012年7月在紹興市人民醫(yī)院接受乳腺癌改良根治術(shù)、同期腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)≥5個(gè)的女性進(jìn)展期乳腺癌病例53例，術(shù)前均未進(jìn)行任何治療。取存檔蠟塊原發(fā)灶5個(gè)位點(diǎn)及全部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移位點(diǎn)制備組織芯片，組織芯片直徑2mm、高3～4mm。采用徠卡Bon

3、d-Max全自動(dòng)免疫組化儀對(duì)ER、PR蛋白進(jìn)行染色，ER及PR一抗克隆號(hào)分別為SP1和SP2，購(gòu)自福建邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。雙探針熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization)法檢測(cè)HER-2/neu基因狀態(tài)，HER-2/neu DNA探針試劑盒購(gòu)自北京金菩嘉醫(yī)療科技有限公司。每個(gè)位點(diǎn)中ER或PR的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥10％視為陽(yáng)性。FISH判讀時(shí)每個(gè)位點(diǎn)至少計(jì)數(shù)20個(gè)不重疊的癌細(xì)胞。HER-2/neu

4、基因信號(hào)的總數(shù)與17號(hào)染色體信號(hào)的總數(shù)比值＞2.2或眾多HER-2/neu基因信號(hào)連接成簇，視為擴(kuò)增。比值＜1.8視為無擴(kuò)增，比值介于1.8～2.2視為臨界值。同一病例所有位點(diǎn)ER蛋白表達(dá)或PR蛋白表達(dá)或HER-2/neu基因狀態(tài)都一致者，視為均質(zhì)性病例，只要有不一致，則為異質(zhì)性病例。
　　結(jié)果：制備19個(gè)芯片蠟塊，共867個(gè)位點(diǎn)，ER、PR、HER-2/neu的有效位點(diǎn)數(shù)分別為819，813，776。ER、PR的有效例數(shù)均為53

5、例，HER-2/neu有效例數(shù)為52例。ER、PR蛋白表達(dá)在乳腺癌所有位點(diǎn)呈均質(zhì)性的病例分別占66.0％和67.9％，ER、PR蛋白在乳腺癌原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶間的一致性差，一致性系數(shù)(k)值分別為0.324和0.156。說明ER、PR蛋白異質(zhì)性顯著，穩(wěn)定性差。HER-2/neu基因在乳腺癌原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶間顯示出極好的一致性，一致性系數(shù)(k)值為0.840。大部分(92.3％)病例HER-2/neu基因呈高度均質(zhì)穩(wěn)定狀態(tài)，部分病例(7.7％)

6、呈異質(zhì)性。ER均質(zhì)性類型以及原發(fā)灶均質(zhì)性而轉(zhuǎn)移灶異質(zhì)性的類型具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，PR均質(zhì)性類型、HER-2/neu均質(zhì)性類型都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ER、PR蛋白表達(dá)均質(zhì)性病例或HER-2/neu基因狀態(tài)均質(zhì)性病例的發(fā)病年齡、腫瘤大小、淋巴結(jié)個(gè)數(shù)、腫瘤部位與異質(zhì)性病例相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　結(jié)論：同期腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)≥5個(gè)的中國(guó)女性進(jìn)展期乳腺癌，部分病例需在原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶多點(diǎn)取樣才能全面反映ER、PR蛋白表達(dá)和HER-