柿鞣質(zhì)水提取物對白色念珠菌耐藥基因的作用.pdf

1、我國是世界上柿樹的主產(chǎn)及原產(chǎn)國。柿果是我國的第五大時令水果，產(chǎn)量和栽培面積都很可觀。柿子具有多種功能，包括降血壓、解酒、解蛇毒、抗癌及抗病毒等。醫(yī)學研究和現(xiàn)代食品表明柿果實含有豐富的營養(yǎng)成分，而其主要的功效部分為鞣質(zhì)。鞣質(zhì)是一種廣泛存在于植物界中的一類分子量較大的復雜多元酚類化合物，能與蛋白質(zhì)、生物堿結(jié)合。鞣質(zhì)具有的收斂止血、抗菌、保護粘膜等作用已被研究證實。隨著對鞣質(zhì)結(jié)構(gòu)及化學成分的研究，越來越多的國內(nèi)外學者致力于探討其在臨床疾病中的

2、作用。
　　白色念珠菌病是臨床上真菌感染的常見疾病。近年來，由于濫用廣譜抗生素、放療、化療以及免疫抑制劑的應(yīng)用，以及越來越多的口腔義齒、支架、靜脈插管、器官的移植等的應(yīng)用，導致口腔白色念珠菌病的發(fā)生率越來越高。而隨著抗真菌藥物的使用，致使耐藥菌株的產(chǎn)生，口腔的健康微生態(tài)環(huán)境遭到破壞，從而加大了治療白色念珠菌病的難度。從天然植物中提取有效成分來治療白色念珠菌病成為新的研究趨勢。中草藥在抗真菌方面的有著很大的優(yōu)勢，其在抗真菌感染的同時

3、可以調(diào)節(jié)免疫力，且不良反應(yīng)較少，不易產(chǎn)生耐藥性。鞣質(zhì)因其強大的功效成為國內(nèi)外學者的主要研究對象，因此通過實驗研究柿鞣質(zhì)水提取物對口腔白色念珠菌的抑制作用，對治療白色念珠菌病具有積極作用。
　　目的:
　　我國有很豐富的柿子資源，醫(yī)學研究和現(xiàn)代食品指明柿果實具有重要的保健價值，鞣質(zhì)已被證實為而其主要藥效成分。國內(nèi)外學者對柿鞣質(zhì)的研究越來越多，本研究對不同品種柿果實的鞣質(zhì)含量進行比較，為柿鞣質(zhì)在口腔領(lǐng)域的應(yīng)用提供依據(jù)，對柿鞣質(zhì)的

4、研究和探索起到積極作用。
　　隨著白色念珠菌病的發(fā)生率越來越高，而其耐藥性的產(chǎn)生又增加了治療的困難，因此尋找耐藥性小，毒副作用少的抗真菌藥物成為必然趨勢。本實驗體外研究了柿鞣質(zhì)水提取液對白色念珠菌的抑菌作用及其對耐藥基因CDR1表達的影響。此研究為抗真菌感染藥物的研究提供新的方向，為臨床合理選擇用藥提供科學依據(jù)。
　　方法:
　　1、柿果實鞣質(zhì)的提取:分別對蓋柿、牛心柿、大磨盤柿的全柿果實打碎研磨，乙醇浸泡后進行超聲提

5、取，濃縮液經(jīng)蒸餾水稀釋，AB-8大孔樹脂吸附除糖，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，使用聚砜中空纖維超濾膜超濾，獲得的柿鞣質(zhì)溶液的分子量為10000，利用Folin-Denis法測定其鞣質(zhì)的含量，比較不同品種柿果實鞣質(zhì)含量的差異。
　　2、全柿果實鞣質(zhì)水提取液對白色念珠菌的體外抑菌實驗:采用改良液體二倍稀釋法，可檢測柿鞣質(zhì)水提取液對白色念珠菌的最小抑菌濃度，另外采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)方法檢測白色念珠菌耐藥基因CDR1在不同藥物濃度用藥后的表達水平。

6、>　　結(jié)果:
　　1、鞣質(zhì)對照品溶液在1.6×10-3 mg/mL～7.2×10-3mg/mL范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，其標準曲線的回歸方程為y=39.583x+0.013，相關(guān)系數(shù)R2=0.994。其中每克蓋柿鞣質(zhì)含量為202±3.6mg，每克牛心柿鞣質(zhì)含量為73±2.4mg，每克大磨盤柿鞣質(zhì)含量為52±3.0mg。
　　2、柿鞣質(zhì)水提取液對白色念珠菌的最低抑菌濃度為0.1159 mg/mL;伴隨著藥物濃度梯度的增加，白色念珠菌相