同源異體肌衛(wèi)星細(xì)胞移植加速受損肌肉的修復(fù).pdf

1、運(yùn)動(dòng)拉傷、撞傷等或肌肉代謝紊亂引起的肌肉損傷和缺失，嚴(yán)重影響我們的日常生活。而肌肉組織的可再生能力主要依靠肌衛(wèi)星細(xì)胞，大面積的肌肉損傷由于損傷部位肌衛(wèi)星細(xì)胞的缺乏而不能完全再生，產(chǎn)生沒(méi)有肌肉收縮功能的疤痕。已有研究表明體外分離的肌衛(wèi)星細(xì)胞移植到肌萎縮癥動(dòng)物模型后，肌肉修復(fù)能力有所提高，但是仍然存在許多問(wèn)題，使得最終移植效果不顯著。
　　本實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果表明，CTX損傷小鼠腓腸肌后移植同源異體肌衛(wèi)星細(xì)胞，不同時(shí)期受損組織石蠟切片

2、HE染色觀察到肌肉修復(fù)明顯加快。因此，本研究則通過(guò)RT-PCR和Western-blot檢測(cè)肌衛(wèi)星細(xì)胞移植后不同時(shí)間點(diǎn)肌生成相關(guān)基因，Notch信號(hào)部分基因，炎癥反應(yīng)相關(guān)基因的表達(dá)變化，從分子水平進(jìn)一步探討肌肉損傷修復(fù)加速的機(jī)理。研究結(jié)果如下：
　　1.移植肌衛(wèi)星細(xì)胞組的小鼠受損部位的肌衛(wèi)星細(xì)胞活化、增殖、分化相關(guān)基因MyoD，Pax7，P21，MyoG(myogenin)的mRNA表達(dá)水平在第3天達(dá)到最高值，提前且高于注射PBS

3、組。而這些基因的蛋白表達(dá)水平也在移植肌衛(wèi)星細(xì)胞組更早的達(dá)到較高水平。在移植肌衛(wèi)星細(xì)胞組分化后期表達(dá)基因MYH1的mRNA和蛋白水平也提前且高于對(duì)照組，說(shuō)明移植肌衛(wèi)星細(xì)胞后受損部位肌衛(wèi)星細(xì)胞參與到肌再生過(guò)程的時(shí)間提前，肌再生能力也加強(qiáng)了。
　　2.Notch1的mRNA和蛋白表達(dá)在移植肌衛(wèi)星細(xì)胞組中第7天達(dá)到最高峰高于對(duì)照組。檢測(cè)Notch信號(hào)中配體Jagged1的mRNA表達(dá)也是在第7天移植肌衛(wèi)星細(xì)胞組顯著高于注射PBS組，同時(shí)N

4、otch1胞內(nèi)活化片段NICD的蛋白表達(dá)在移植肌衛(wèi)星細(xì)胞組第3,7天均高于PBS組。說(shuō)明在CTX損傷的腓腸肌中移植肌衛(wèi)星細(xì)胞能更早的提高Notch信號(hào)通路中配體Jagged1，活化受體Notch1的表達(dá)，以及它們之間的作用。而Notch信號(hào)靶基因Hes1的mRNA表達(dá)在第3天移植肌衛(wèi)星細(xì)胞組的表達(dá)降低，直到移植后的第14天Hes1的表達(dá)在肌衛(wèi)星細(xì)胞組顯著高于PBS組，表明Hes1可能還受到其他Notch受體的影響。
　　3.移植肌