肺腺癌A549紫杉醇耐藥細(xì)胞株建立以及新型紫杉烷類化合物多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用及機(jī)制研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文肺腺癌A549紫杉醇耐藥細(xì)胞株建立以及新型紫杉烷類化合物多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用及機(jī)制研究姓名：趙鑫申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：陳曉光20040501博士論文 中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院論文摘要肺腺癌A 5 4 9 紫杉醇耐藥細(xì)胞株建立以及新型紫杉烷類化合物多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用及機(jī)制研究腫瘤多藥唰藥( m u l t i d r u gr e s i s t a n c e ，M D R ) 是影響腫瘤化

2、療臨床療效的主要障礙之一。探討M D R 產(chǎn)生機(jī)制、尋找克服腫瘤M D R 逆轉(zhuǎn)劑已經(jīng)成為化療藥物發(fā)展的方向。本文第一部分采用逐步增加劑量法，以紫杉醇為誘導(dǎo)藥物，經(jīng)過1 5 個(gè)月的誘導(dǎo)，建立了A 5 4 9 紫杉醇耐藥細(xì)胞株——A 5 4 9 廠r a X 0 1 ，并對(duì)耐藥細(xì)胞株進(jìn)行了初步的生物學(xué)特性鑒定和耐藥機(jī)制探討。第二部分對(duì)三個(gè)T a x i n i n e 衍生物S y l 2 1 9 、S y l 2 2 0和S y l 2

3、 2 1 抗腫瘤活性、體內(nèi)體外的多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用、誘導(dǎo)黑色素瘤細(xì)胞分化及抑制血管生成等作用進(jìn)行了研究，并對(duì)S y l 2 2 0 多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用的可能機(jī)制進(jìn)行了多方面探討。1 ．肺腺癌A 5 4 9 紫杉醇耐藥細(xì)胞株建立體外建立多藥耐藥細(xì)胞系是研究腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生多藥耐藥機(jī)制的重要手段，也是篩選新型而』藥逆轉(zhuǎn)劑的工具和方法。經(jīng)過1 5 個(gè)月逐步增加劑量的藥物誘導(dǎo)和克隆篩選，建立了能夠在含2 ×1 0 墻m o l ／L 紫杉醇培

4、養(yǎng)液中穩(wěn)定傳代的人N s c L c ——肺腺癌A 5 4 9 細(xì)胞株的M D R 亞株——A 5 4 9 廠r a ) 【0 1 。A 5 4 9 ／T a x o l 對(duì)抗微管類、葸環(huán)類、鬼臼毒素類以及喜樹堿類等抗腫瘤藥物具有交叉耐藥性，表現(xiàn)為典型的M D R 表型。經(jīng)典的耐藥逆轉(zhuǎn)劑V e r a p a m i l 能夠逆轉(zhuǎn)其對(duì)T a x o l 的耐藥性。T a x i n i n e 及衍生物S y l 2 2 0 ( 為正在

5、研究開發(fā)的耐藥逆轉(zhuǎn)劑，見第二部分) 亦能部分恢復(fù)A 5 4 9 ／T a x o l 對(duì)T a x o l 的敏感性。與親代A 5 4 9 細(xì)胞株比較，A 5 4 9 ／T a x o l 細(xì)胞形態(tài)學(xué)上并無明顯改變，細(xì)胞增殖速度相對(duì)變慢，生長曲線表現(xiàn)為達(dá)峰時(shí)間滯后，峰值稍低?？寺≡纬蓪?shí)驗(yàn)也表明A 5 4 9 ／T a x o l 細(xì)胞增殖潛力比親代A 5 4 9 細(xì)胞稍差，集落形成數(shù)分別為5 6 ，0 0 ±9 ．9 0 ／