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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察阿爾茨海默?。ˋlzheimer disease,AD)患者與健康對(duì)照組外周血單核細(xì)胞中OSTM1(骨硬化癥相關(guān)蛋白1)表達(dá)的差異并探討其意義。
方法:
選擇AD患者與健康對(duì)照組各30例,采用Ficoll-Hypaque密度梯度離心法分離人外周血單核細(xì)胞,培養(yǎng)24h收集細(xì)胞。細(xì)胞爬片,采用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù),觀察OSTM1在單核細(xì)胞中分布并粗略比較兩組熒光信號(hào)強(qiáng)弱;蛋白免疫印記法(Wester
2、n blotting)檢測(cè)OSTM1蛋白表達(dá)水平;實(shí)時(shí)定量多聚鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)OSTM1mRNA表達(dá)水平。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
1.OSTM1表達(dá)情況:人外周血中表達(dá)OSTM1,主要集中在胞漿,與健康組比較,AD組細(xì)胞熒光信號(hào)明顯增強(qiáng)且分布范圍擴(kuò)大;
2.兩組OSTM1在蛋白表達(dá)水平差異:AD組 OSTM1表達(dá)(0.53?0.04)較對(duì)照組(0.36?0.03)較顯著升高(P<0.05);
3、3.兩組OSTM1在基因水平表達(dá)情況:AD組與對(duì)照組OSTM1 mRNA分別為(0.75?0.13)和(0.32?0.11),AD組OSTM1 mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組相比,顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
1.明確了OSTM1在人外周血中的表達(dá),主要集中在細(xì)胞漿,細(xì)胞核中未見OSTM1染色,且AD組表達(dá)較高;
2.OSTM1在蛋白水平表達(dá)上,AD組較對(duì)照組升高;
3.OST
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