山羊精子介導基因轉移的實驗研究.pdf

1、精子介導基因轉移(Sperm-mediated gene transfer,SMGT)是以精子為載體,在受精時將外源目的基因導入卵母細胞,是目前轉基因動物研究中簡單而高效的方法學之一.SMGT的核心是高效、穩(wěn)定的體外受精技術和精子轉染技術,前者不僅有利于獲得大量的胚胎來源,而且還對胚胎質量以及胚胎移植后的胎兒發(fā)育和動物個體獲得有重要影響,后者是提高轉基因動物成功率的關鍵和保證.由于國內外目前在山羊體外受精和精子轉染方面的研究尚不成熟,影

2、響了我們即將開展的以精子介導方法為基礎的轉基因山羊乳腺生物反應器課題進程.為此,該實驗對山羊體外受精技術和精子轉染技術展開研究,以建立SMGT技術平臺,為轉基因山羊乳腺生物反應器的研制奠定基礎.該研究共分為5部分,第一、二、三部分分別就體外受精技術中的3個關鍵環(huán)節(jié):卵母細胞成熟、精子獲能和受精、早期胚胎體外培養(yǎng)進行研究,探討體外受精影響因素,優(yōu)化培養(yǎng)系統(tǒng),建立穩(wěn)定的體外胚胎生產體系.第四部分對精子供體選擇、外源DNA轉染精子的影響因素、