IL-6R抗體調節(jié)PMMA骨水泥介導的滑膜成纖維細胞MMPs和血管化因子mRNA表達的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討IL-6R抗體對PMMA骨水泥介導的滑膜成纖維細胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGFmRNA表達的調節(jié)。
　　方法:從全髖關節(jié)置換術中獲取滑膜組織消化并傳代培養(yǎng)。倒置相差顯微鏡對滑膜細胞進行形態(tài)學觀察,免疫細胞化學(SABC法)染色對滑膜成纖維細胞進行鑒定。根據加入不同培養(yǎng)物,實驗分為3組:PMMA組:75μg/mlPMMA骨水泥顆粒;IL-6R抗體組:10ng/mlIL-6R抗體+75μg/mlPMMA骨水泥顆

2、粒;空白對照組。采用細胞計數試劑盒-8(CellCountingKit-8,CCK-8)檢測IL-6R抗體、PMMA對滑膜成纖維細胞增殖活力影響;實時熒光定量PCR(realtimefluorescencequantitativepolymerasechainreaction,FQ-PCR)檢測MMP-1、MMP-3、VEGF和PDGFmRNA表達。
　　結果:原代滑膜細胞貼壁后,初期為短梭形。連續(xù)3次傳代后,95％以上細胞為長梭

3、形成纖維細胞樣細胞。SABC法染色檢測結果顯示:上述成纖維樣細胞抗CD68抗體陰性,抗vimentin抗體呈棕黃色,為陽性反應。CCK-8檢測顯示:與PMMA組和空白對照組相比,IL-6R抗體組吸光度(A)值明顯降低(P<0.01);而空白對照組與PMMA組間吸光度(A)值無統計學差異(P>0.05)。FQ-PCR檢測發(fā)現:與PMMA組和空白對照組相比,IL-6R抗體組中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGFmRNA的表達明顯受到抑

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