子宮平滑肌收縮及其輸電網(wǎng)發(fā)子在子宮腺肌病致痛機(jī)制中的作用.pdf

1、背景：子宮腺肌病(adenomyosis，AM)已成為危害婦女健康的主要疾病之一。AM的主要臨床表現(xiàn)是月經(jīng)量增多和經(jīng)期延長(zhǎng)，以及逐漸加劇的進(jìn)行性痛經(jīng)。痛經(jīng)作為AM的第二大癥狀，其發(fā)生機(jī)制目前仍不清楚。AM的腹腔疼痛是一種內(nèi)臟痛覺，有證據(jù)提示痛經(jīng)與其子宮平滑肌異常收縮密切相關(guān)。正常子宮收縮在月經(jīng)期和排卵期最劇，而AM患者的腹腔疼痛在月經(jīng)期最劇，這中間絕不僅僅是巧合。本課題研究AM的子宮收縮情況以及相關(guān)分子表達(dá)的變化，探討AM疼痛發(fā)生機(jī)制。

2、
　　 第一部分催產(chǎn)素受體在子宮腺肌病患者子宮平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)情況
　　 目的：探討AM患者M(jìn)SMC(myometrial smooth muscle cells，MSMC)催產(chǎn)素受體(oxytocin receptor，OTR)的表達(dá)情況，以及曲古抑菌素A(Trichostatin A，TSA)和穿心蓮內(nèi)酯(Andrographolide，Andro)對(duì)OTR表達(dá)的影響。方法：選取20例AM患者，作為病例組。另選10

3、例非AM患者作為對(duì)照組。采用視覺模擬評(píng)分法(visual analogue scale，VAS)評(píng)價(jià)患者痛經(jīng)程度。原代培養(yǎng)兩組的MSMC，采用realtime PCR和Western Blot方法比較兩者OTR在mRNA和蛋白水平表達(dá)的差異。用不同濃度組蛋白去乙酰化酶抑制劑TSA和NF-κB抑制劑Andro分別處理病例組的MSMC，檢測(cè)處理前后OTR在mRNA和蛋白水平表達(dá)的改變。結(jié)果：AM患者OTR表達(dá)明顯高于對(duì)照(p<0.01)，且

4、與VAS評(píng)分相關(guān)，相關(guān)系數(shù)是0.746。TSA和Andro均可以抑制病例組MSMC的OTR表達(dá)。結(jié)論：OTR表達(dá)增高與AM痛經(jīng)的發(fā)生有關(guān)。而且，結(jié)果提示組蛋白去乙?；敢种苿┖蚇F-κB抑制劑可能對(duì)AM的痛經(jīng)有治療作用。
　　 第二部分體外檢測(cè)子宮腺肌病子宮平滑肌收縮情況
　　 目的：探討AM子宮平滑肌組織體外收縮情況，分析其與AM腹腔疼痛的關(guān)系。方法：病例組和對(duì)照組的選取，如前所述。VAS評(píng)價(jià)患者痛經(jīng)程度。所有子宮平滑

5、肌肌條均在手術(shù)后盡快收集。體外使用生理記錄儀檢測(cè)AM與對(duì)照子宮平滑肌肌條收縮情況。分別計(jì)算各患者子宮收縮的頻率和振幅，并與OTR表達(dá)及VAS評(píng)分進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果：AM子宮平滑肌收縮振幅大于對(duì)照組，與OTR表達(dá)和VAS評(píng)分相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別是0.672和0.601。結(jié)論：AM子宮收縮振幅增高可能與AM的腹腔疼痛發(fā)生有關(guān)。
　　 第三部分一些候選藥物對(duì)小鼠子宮腺肌病模型的治療作用
　　 目的：觀察一些候選藥物對(duì)小鼠AM模

6、型的治療作用。方法：通過(guò)對(duì)新生小鼠給予一定量的他莫西芬干預(yù)，誘導(dǎo)小鼠AM模型。模型組小鼠于4月齡始隨機(jī)分組，治療組給予藥物處理。在治療前后，分別熱板試驗(yàn)觀測(cè)治療前后小鼠的熱板痛閾時(shí)間。最后一次熱板實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，處死小鼠，取其子宮，檢測(cè)其體外收縮情況，并用HE染色比較治療組與非治療組小鼠子宮的病變情況。結(jié)果：治療組小鼠熱板痛閾時(shí)間有所改善，HE染色顯示病變對(duì)肌層侵潤(rùn)也得到抑制，子宮收縮振幅也降低。結(jié)論：這些藥物能改善AM模型小鼠的痛覺和子宮

7、收縮，是治療AM的前景藥物。
　　 第四部分一些候選藥物治療小鼠子宮腺肌病模型時(shí)相關(guān)分子表達(dá)情況
　　 目的：觀察一些候選藥物處理后，小鼠AM模型子宮和DRG組織的相關(guān)分子表達(dá)情況，探索這些藥物治療AM小鼠模型的機(jī)制。方法：免疫組化方法檢測(cè)子宮CGRP、HDAC2、NGF、OTR、p-p65、TRPV1和DRG組織ASIC3、c-fos、CGRP、NGF、P2X3、TrkA、TRPV1、NMDAR1的表達(dá)。結(jié)果：各治療組