版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討5-氟尿嘧啶對(duì)體外培養(yǎng)的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖和凋亡方面的生物學(xué)影響。 方法:①成纖維細(xì)胞體外原代培養(yǎng):手術(shù)取6例瘢痕疙瘩(Keloid,K)(耳垂、大腿各1例、胸前、上臂各2例),均為安徽醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院整形外科手術(shù)病例,按文獻(xiàn)方法進(jìn)行成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng),待細(xì)胞融合后傳代,實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞均為處于4~8代對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞(Keloid fibroblast,KF);②將不同濃度5-氟尿嘧啶(5-fluoro
2、uracil,5-FU)(0.1,0.2,0.4,0.8,1.6g/L)對(duì)4~8代瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞分別進(jìn)行干預(yù)24h,48h,72h,采用四甲基偶氮唑鹽比色法檢測(cè)各濃度藥物對(duì)成纖維細(xì)胞的抑制率,計(jì)算5-氟尿嘧啶對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(50%Inhibifiory concentration,IC50)值。再選用不超過(guò)IC50的5個(gè)濃度:0.2,0.3,0.4,0.5,0.6 g/L,作為余下實(shí)驗(yàn)濃度;③應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(Fl
3、ow cytometry,F(xiàn)CM)分析法觀察5-氟尿嘧啶干預(yù)后KF的細(xì)胞周期變化及細(xì)胞凋亡百分率;④應(yīng)用Hoechst33258熒光染色法觀察凋亡成纖維細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征;⑤應(yīng)用蛋白免疫印跡技術(shù)(Western-blot)檢測(cè)5-氟尿嘧啶對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響。 結(jié)果:6例瘢痕疙瘩標(biāo)本原代培養(yǎng)成纖維細(xì)胞成活良好,均用于實(shí)驗(yàn),進(jìn)入結(jié)果分析。①0.1,0.2,0.4,0.8,1.6 g/L 5-氟尿嘧啶分
4、別干預(yù)24h,48h,72h后,各組間KF細(xì)胞抑制率兩兩比較差異均有顯著性(P<0.01)。并采用作圖法求得三組不同干預(yù)時(shí)間下的半數(shù)抑制濃度IC50分別為(0.816±0.041)g/L, (0.637±0.028)g/L, (0.430±0.032)g/L;②0.2,0.3,0.4,0.5,0.6 g/L 5-氟尿嘧啶干預(yù)48 h后,KF細(xì)胞凋亡率組間兩兩比較有差異(P<0.05),與對(duì)照組比較,差異有顯著性意義(P<0.01);
5、 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組細(xì)胞周期百分?jǐn)?shù)比較,表現(xiàn)為G0/G1期停滯,S期減少,各組間兩兩比較有差異(P<0.05);③各濃度5.氟尿嘧啶干預(yù)48 h后,Hoechst 33258熒光染色觀察KF均有不同程度核濃縮,表明KF發(fā)生了不同程度的凋亡;④經(jīng)不同濃度5-氟尿嘧啶干預(yù)KF 48 h后,實(shí)驗(yàn)組Bcl-2蛋白表達(dá)均低于對(duì)照組(P<0.05),實(shí)驗(yàn)組Bax蛋白表達(dá)均高于對(duì)照組(P<0.05)。 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步揭示了5-氟尿嘧啶治療
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 電離輻射對(duì)體外培養(yǎng)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖和凋亡的影響.pdf
- 雷帕霉素對(duì)體外培養(yǎng)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖的影響.pdf
- 環(huán)孢素A對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞形態(tài)、增殖及凋亡的影響.pdf
- FRNK對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞凋亡的影響.pdf
- 依那普利拉抑制瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 5-氟尿嘧啶術(shù)前化療對(duì)胃癌細(xì)胞凋亡和增殖的影響.pdf
- 5-氟尿嘧啶對(duì)兔耳增生性瘢痕的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 5-氟尿嘧啶對(duì)病理性瘢痕作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 松弛素對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞體外增殖影響的初步研究.pdf
- IFN-γ對(duì)體外培養(yǎng)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞增殖及凋亡的影響.pdf
- 鹽酸氨酮戊酸光動(dòng)力法對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖和凋亡的研究.pdf
- 瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞DNMT1的表達(dá)及5-氮雜-2-脫氧胞苷對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的影響.pdf
- miR-199a-5p靶基因預(yù)測(cè)及對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖、凋亡的影響.pdf
- 瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞耐藥性和紫草素對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用的研究.pdf
- 5-氟尿嘧啶食道支架的制備和體外研究.pdf
- Fas基因轉(zhuǎn)染瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞并誘導(dǎo)其凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 水飛薊賓對(duì)體外培養(yǎng)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的增殖及mTOR和HIF-1α表達(dá)的影響.pdf
- 瘢痕疙瘩miRNA表達(dá)譜的篩選及miR-199A-5p對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖功能的影響.pdf
- 二甲基乙二?;拾彼釋?duì)體外培養(yǎng)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的增殖、凋亡、膠原合成的影響.pdf
- RNAi沉默TIEG對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞功能影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論