瘦素對小鼠成骨細胞MC3T3-E1增殖及OPG-RANKL mRNA表達的影響.pdf

1、目的： 研究不同濃度瘦素對小鼠前成骨細胞MC3T3—E1細胞增殖及OPG mRNA、RANKL mRNA表達的影響，探討瘦素通過成骨細胞影響骨代謝的可能機制，為臨床用藥提供一定理論依據(jù)。 方法： 1、小鼠前成骨細胞MC3T3—E1細胞的傳代培養(yǎng)。 2、不同濃度的瘦素(0、10、20、40、80、160μM)干預(yù)前成骨細胞MC3T3—E1，24小時后采用噻唑藍(MTT)法測定OD值，了解瘦素對成骨細胞增殖能

2、力的影響。 3、不同濃度的瘦素(0、10、20、40、80、160μM)干預(yù)前成骨細胞MC3T3—E1，用RT—PCR的方法檢測OPG mRNA、RANKL mRNA的表達水平。 4、統(tǒng)計學(xué)方法：實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(-x±s)表示，采用SPSS11.5統(tǒng)計分析軟件對起進行分析，各組間比較采用單因素方差分析(One—way ANOVE)，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)差異。 結(jié)果： 1、MTT比色法測定培養(yǎng)液OD

3、值，結(jié)果顯示，隨著瘦素濃度增高，各組OD值顯著增高，且呈濃度依賴性，對照組與實驗組，實驗組組間比較，均有顯著性統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。 2、通過半定量RT—PCR檢測MC3T3—E1細胞OPG和RANKL mRNA的表達顯示，隨著瘦素濃度的增加，可使MC3T3—E1細胞表面OPG mRNA表達升高，光密度比值明顯增加；而RANKL mRNA的表達降低，光密度比值明顯減低，且都呈劑量依賴性變化。對照組與10ng/ml相比(P＞