天麻地上莖活性成分提取分離及質(zhì)量標準研究.pdf

1、目的：研究天麻地上莖活性成分提取分離純化技術及生藥質(zhì)量標準，探討天麻地上莖的開發(fā)利用價值，為應用研究奠定基礎。 方法：1.實驗材料采制：采于陜西勉縣中藥材新技術開發(fā)研究所示范園。收集苗期、花期、果期、成熟期的天麻地上莖，洗凈，煮透，低溫干燥。另一部分成熟期的天麻地上莖自然干燥。2.活性成分提取分離純化技術研究：①天麻多糖的提取分離純化技術研究：以天麻多糖含量為指標，采用正交試驗設計研究天麻地上莖天麻多糖的提取工藝；以天麻多糖純度

2、為考察指標，研究天麻地上莖天麻多糖經(jīng)過大孔吸附樹脂后的純化程度。用紫外分光光度法結合蒽酮一硫酸法測定天麻多糖的含量。②天麻素的提取分離純化技術研究：以天麻素含量為考察指標，采用正交試驗設計研究天麻地上莖天麻素的提取工藝；以天麻素純度為考察指標，研究天麻地上莖天麻素經(jīng)過大孔吸附樹脂和硅膠后的純化程度。用HPLC法測定天麻素的含量。色譜條件：Kromail ODS色譜柱(150mm×4.6mm，5μm)，流動相；乙腈-0.05﹪磷酸溶液(2

3、∶98)，檢測波長：220nm。3.通過顯微鑒別、理化鑒別、天麻素含量測定、檢查等初步確定天麻地上莖的質(zhì)量標準。 結果：1.活性成分提取分離純化技術研究：①天麻地上莖天麻多糖的最佳提取工藝為加12倍量水，100Hz超聲提取1次，每次40min，提取液濃縮加95﹪乙醇使成60﹪乙醇沉淀?；蚣?0倍量水，中等火力微波提取1次，每次10min，提取液濃縮加95﹪乙醇使成80﹪乙醇沉淀。經(jīng)大孔吸附樹脂(HPD100、DM-18、D-10

4、1)純化后，天麻地上莖天麻多糖的純度分別為：64.74﹪、 65.24﹪、 60.46﹪，與未經(jīng)處理的提取液中天麻多糖純度42.16﹪相比分別提高了22.58﹪、23.08﹪、18.3﹪，其中DM-18樹脂純化效果最好。葡萄糖含量在0.04mg～0.36mg范圍內(nèi)其含量與吸光度呈良好的線性關系，回歸方程：A=0.003095×C+0.00125，R=0.9996，平均回收率為98.14﹪，RSD為1.19﹪。②天麻地上莖天麻素的最佳提取

5、工藝為10倍量的70﹪乙醇回流提取3次，每次1h；經(jīng)大孔吸附樹脂(S-8、DM-18、DM-130、DM-7HP)和硅膠純化后，天麻地上莖天麻素的純度分別為：12.3649﹪、23.5786﹪、 18.3147﹪、14.6573﹪、14.9955﹪，與未經(jīng)處理的提取液中天麻素純度7.3462﹪相比分別提高了1.7倍、3.2倍、2.5倍、2.0倍、2.0倍，其中DM-18樹脂純化效果最好。天麻素在0.098～0.98μg范圍內(nèi)，線性關系良