杜仲雄花功能成分的提取、分離及活性研究.pdf

1、杜仲雄花是我國(guó)寶貴的藥材資源，含有豐富的天然活性物質(zhì)，但是目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于杜仲雄花的研究較少。本課題采用溶劑萃取、硅膠柱層析、薄層層析、生物活性研究等手段對(duì)杜仲雄花進(jìn)行研究，并對(duì)杜仲雄花的藥理學(xué)作用進(jìn)行探討。以期為合理利用杜仲雄花資源提供科學(xué)依據(jù)。
　　本研究在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，通過(guò)響應(yīng)面優(yōu)化杜仲雄花乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物和總黃酮的提取工藝，得到最佳提取工藝參數(shù)；進(jìn)而將色譜分離法和鎮(zhèn)靜催眠、抑菌活性和抗腫瘤活性篩選試驗(yàn)相結(jié)合

2、確定其活性部分。結(jié)果表明：乙醇提取物的最佳提取條件為：提取溫度62.81℃，提取時(shí)間2.91h，乙醇濃度59.84％；黃酮提取物的最佳提取條件為：提取溫度65℃，提取時(shí)間2.84h，乙醇濃度59.58%；乙酸乙酯提取物的最佳提取條件為：提取溫度50.50℃，提取時(shí)間53.14h，液料比10.12:1；正丁醇提取物的的最佳提取條件為：提取時(shí)間26h，提取溫度52.98℃，液料比為10.63:1。杜仲雄花不同極性提取物都具有一定的鎮(zhèn)靜催眠和

3、抑菌活性，其活性部分為乙酸乙酯、正丁醇提取物和生物堿。水溶性生物堿和脂溶性生物堿均具有良好的鎮(zhèn)靜催眠活性，均與戊巴比妥鈉表現(xiàn)出良好的協(xié)同作用；且水溶性生物堿表現(xiàn)出抗驚厥作用。水溶性和脂溶性生物堿對(duì)七種供試菌中的炭疽桿菌具有較好的抑制作用，其抑菌圈直徑＞15mm。脂溶性生物堿體對(duì)人乳腺癌細(xì)胞（MDA-MB-231）具有抑制作用，IC50為6.38mg/mL。對(duì)杜仲雄花活性部分中的乙酸乙酯和正丁醇提取物進(jìn)行初步分離，得到乙酸乙酯提取物初分物

4、的抑菌活性的部分為樣品1（甲醇10%）和樣品2（20%），其對(duì)金黃色葡萄球菌、炭疽桿菌和枯草芽孢桿菌具有較好的抑制作用，其抑菌圈直徑＞15mm，對(duì)大腸桿菌和黑曲霉具有一定的抑制作用；正丁醇提取物初分物的抑菌活性部分為樣品4（甲醇40%），其對(duì)金黃色葡萄球菌和炭疽桿菌抑制作用較強(qiáng)，對(duì)枯草芽孢桿菌、大腸桿菌和黑曲霉具有一定的抑制作用。正丁醇提取物初分物的抗腫瘤活性部分為樣品1（甲醇10%）和樣品6（純甲含氨），其對(duì)人乳腺癌細(xì)胞（MDA-MB