運用SELDI-TOF-MS技術(shù)檢測腫瘤回流靜脈血建立結(jié)直腸癌同時性和異時性肝轉(zhuǎn)移診斷預(yù)測模型研究.pdf

1、目的:運用SELDI-TOF-MS(表面增強激光解吸電離-飛行時間-質(zhì)譜)技術(shù)通過結(jié)直腸腫瘤回流靜脈血檢測尋找結(jié)直腸癌無肝轉(zhuǎn)移、結(jié)直腸癌合并同時性肝轉(zhuǎn)移以及異時性肝轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白質(zhì),建立血清蛋白質(zhì)指紋圖譜診斷預(yù)測模型,并進行驗證和評價。
　　 方法:復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院普外科2005年3月-2006年12月間結(jié)直腸癌病例200例,分為結(jié)直腸癌無肝轉(zhuǎn)移組(n=127)、結(jié)直腸癌合并同時性肝轉(zhuǎn)移組(簡稱同時性肝轉(zhuǎn)移組,n=56)及結(jié)直

2、腸癌異時性肝轉(zhuǎn)移組(簡稱異時性肝轉(zhuǎn)移組,n=17),術(shù)中經(jīng)腫瘤回流靜脈采血,采用CM10芯片為檢測介質(zhì),經(jīng)SELDI-TOF-MS測定,得到蛋白質(zhì)質(zhì)譜,并運用浙江大學(xué)腫瘤研究所蛋白質(zhì)譜數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)軟件(ZJU-PDAS)分析比較,應(yīng)用支持向量機進行訓(xùn)練,建立結(jié)直腸癌無肝轉(zhuǎn)移、結(jié)直腸合并同時性肝轉(zhuǎn)移和結(jié)直腸癌異時性肝轉(zhuǎn)移的診斷預(yù)測模型,并評估預(yù)測模型的準(zhǔn)確率,用10倍交叉驗證的方法進行驗證。
　　 結(jié)果:
　　 1)結(jié)直腸

3、癌無肝轉(zhuǎn)移組與同時性肝轉(zhuǎn)移組比較,得到8個差異蛋白峰(m/z=2691、2748、2761、2875、2894、2988、3381、3406)(P＜0.05),并以此建立診斷預(yù)測模型,其預(yù)測結(jié)直腸癌無肝轉(zhuǎn)移與結(jié)直腸癌合并同時性肝轉(zhuǎn)移的準(zhǔn)確率分別為90.8％,10096,驗證結(jié)果顯示其準(zhǔn)確率分別為74.5％,71.4％。
　　 2)同時性肝轉(zhuǎn)移組與異時性肝轉(zhuǎn)移組比較,得到3個差異蛋白峰(m/z=4210、6124、6446)(P＜

4、0.05),并以此建立診斷預(yù)測模型,其預(yù)測結(jié)直腸癌合并同時性肝轉(zhuǎn)移與結(jié)直腸癌異時性肝轉(zhuǎn)移的準(zhǔn)確率分別為91.1％,88.2％。驗證結(jié)果顯示其準(zhǔn)確率分別為73.3％,76.5％。
　　 3)結(jié)直腸癌無肝轉(zhuǎn)移組與異時性肝轉(zhuǎn)移組比較,得到6個差異蛋白峰(m/z=3179、5366、6123、6445、6538、8613)(P＜0.05),并以此建立診斷預(yù)測模型,其預(yù)測結(jié)直腸癌無肝轉(zhuǎn)移與結(jié)直腸癌合并異時性肝轉(zhuǎn)移的準(zhǔn)確率均為100％。驗證

5、結(jié)果顯示其準(zhǔn)確率分別為94.7％,70.6％。
　　 4)m/z=2960D與3179D的蛋白質(zhì)峰均存在于結(jié)直腸癌無肝轉(zhuǎn)移組與同時性肝轉(zhuǎn)移組,以及結(jié)直腸癌無肝轉(zhuǎn)移組與異時性肝轉(zhuǎn)移組兩組比較中,并且該蛋白質(zhì)峰在結(jié)直腸癌無肝轉(zhuǎn)移組的表達顯著高于其余兩組,提示該兩種蛋白質(zhì)峰升高,結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移可能性大為將降低;m/z=5900D的蛋白質(zhì)峰均存在于同時性肝轉(zhuǎn)移組與結(jié)直腸癌無肝轉(zhuǎn)移組,以及同時性肝轉(zhuǎn)移組與異時性肝轉(zhuǎn)移組兩組比較中,并且該蛋

6、白質(zhì)峰在同時性肝轉(zhuǎn)移組中的表達顯著高于其余兩組,提示該蛋白質(zhì)峰的升高與結(jié)直腸癌合并同時性肝轉(zhuǎn)移明顯相關(guān);m/z=8613D的蛋白質(zhì)均存在于異時性肝轉(zhuǎn)移組與無肝轉(zhuǎn)移結(jié)直腸癌組,以及異時性肝轉(zhuǎn)移組與同時性肝轉(zhuǎn)移組兩組比較中,并且該蛋白質(zhì)峰在異時性肝轉(zhuǎn)移組的表達顯著高于其余兩組,提示該蛋白質(zhì)峰的升高與將來結(jié)直腸癌發(fā)生異時性肝轉(zhuǎn)移有關(guān)。
　　 6)通過腫瘤回流血檢測并建立血清蛋白指紋診斷預(yù)測模型,具有總準(zhǔn)確率89.37％的良好預(yù)測結(jié)果,

7、與CEA相比,具有較大的優(yōu)越性。CEA的敏感性及特異性大約在65％左右。
　　 結(jié)論:
　　 1)運用SELDI-TOF-MS技術(shù)檢測腫瘤靜脈回流血并建立的血清蛋白指紋圖譜模型在預(yù)測結(jié)直腸癌無肝轉(zhuǎn)移、結(jié)直腸癌合并同時性肝轉(zhuǎn)移、結(jié)直腸異時性肝轉(zhuǎn)移中具有較高的準(zhǔn)確率,有望成為肝轉(zhuǎn)移的預(yù)測診斷工具。
　　 2)通過進一步的分離和鑒定,m/z=2960D與3179kD的蛋白質(zhì)峰的升高很可能提示結(jié)直腸癌發(fā)生肝轉(zhuǎn)移的可能性明