天然丙烯基苯化合物微生物轉(zhuǎn)化和代謝的研究.pdf

1、本文通過從果園土樣中篩選耐受高濃度丁香酚和異丁香酚的微生物、檢驗菌株代謝底物能力，獲得了一株能夠在10gl-1異丁香酚濃度下生長的菌株HS8，確定其可以代謝異丁香酚并產(chǎn)生香蘭素。 文章采用氣相色譜/高分辨質(zhì)譜聯(lián)用分析HS8轉(zhuǎn)化異丁香酚的產(chǎn)物，對HS8代謝異丁香酚的途徑進行了研究。氣相色譜檢測到三種主要的異丁香酚代謝產(chǎn)物，通過與標準物質(zhì)的質(zhì)譜圖對比確定其中兩種化合物分別為香蘭素和脫氫二聚異丁香酚。而第三種化合物在數(shù)據(jù)庫中未搜索到完

2、全匹配的物質(zhì)，我們采用高分辨質(zhì)譜分析確定了分子量和分子式，并通過對該物質(zhì)的裂解研究，結(jié)合文獻報道，定性該物質(zhì)為異丁香酚二醇。本研究首次報道了異丁香酚二醇被檢測為枯草芽孢桿菌代謝異丁香酚到香蘭素的中間代謝物。采用HS8休止細胞轉(zhuǎn)化體系對香蘭素及其衍生物代謝進行了研究。綜合實驗結(jié)果，推測了B.subtilisHS8代謝異丁香酚產(chǎn)香蘭素的途徑：異丁香酚首先在丙烯基側(cè)鏈雙鍵處加氧，形成環(huán)氧異丁香酚，環(huán)氧化合物水解后形成異丁香酚二醇，進一步代謝生

3、成香蘭素。香蘭素經(jīng)香蘭酸生成愈創(chuàng)木酚，或直接還原生成香蘭醇。以無細胞提取液作為粗酶檢測香蘭酸脫羧酶的酶活性達到563.9nmolmin-1(mgprotein)-1。HS8代謝異丁香酚產(chǎn)生的香蘭素、香蘭酸、愈創(chuàng)木酚在香料產(chǎn)業(yè)中都是有價值的化合物。脫氫二聚異丁香酚是兩分子異丁香酚脫氫聚合的產(chǎn)物。本工作首次確定了脫氫二聚異丁香酚是HS8轉(zhuǎn)化異丁香酚生成香蘭素的副產(chǎn)物。當(dāng)脫氫二聚異丁香酚大量生成時，異丁香酚轉(zhuǎn)化為香蘭素的量減少，降低了香蘭素的