RO40-8757對(duì)人胰腺癌細(xì)胞株JF-305抗增殖作用及其機(jī)制研究.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文RO408757對(duì)人胰腺癌細(xì)胞株JF305抗增殖作用及其機(jī)制研究姓名：蘇洋申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：郭克建20000501析，以探討R040—8757用于胰腺癌治療的潛力，為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)，為尋找一種新的胰腺癌治療藥物，改善胰腺癌的預(yù)后奠定基礎(chǔ)。材料與方法1選用中國(guó)醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所提供的胰腺癌細(xì)胞株JF一305，在100％濕度，5％CO。，37℃條件下培養(yǎng)于含lo％小牛血清的RPMI一16

2、40培養(yǎng)液中，單層傳代培養(yǎng)。所用藥物R040—8757用二甲基亞砜(DMSO)配成濃度為10也mol／L的溶液，使用時(shí)根據(jù)需要用培養(yǎng)液稀釋。2采用四甲基氮唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)測(cè)定用藥前后細(xì)胞的增殖狀態(tài)。收集濃度為5104／ml的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，以5103／孔的濃度接種于96孔培養(yǎng)板。設(shè)計(jì)4個(gè)用藥組和一個(gè)對(duì)照組，用藥組每孔再加入100弘1適當(dāng)濃度的R040—8757，使不同用藥組R040—8757的濃度分別為10一，10一，10～，104m

3、ol／L；對(duì)照組每孔再加入10咄l培養(yǎng)液。設(shè)4復(fù)孔及本底孔。將96孔板在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24，48，72小時(shí)后，各孔分別加入MTT，培養(yǎng)4小時(shí)后以DMSO溶解，用酶標(biāo)儀測(cè)吸光度值，計(jì)算生長(zhǎng)抑制率值。3應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期變化。JF一305細(xì)胞用lo—stool／LR040—8757處理72小時(shí)，消化收集106個(gè)細(xì)胞，固定后于碘化丙啶一步染色液中染色，在流式細(xì)胞儀上分析細(xì)胞周期的變化?！?WesternBlotting法檢測(cè)p27蛋白表