Cathepsin C在小鼠脫髓鞘模型中的表達(dá)及其臨床意義初步探討.pdf

1、目的:研究Cathepsin C在cuprizone介導(dǎo)小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervussystem，CNS）脫髓鞘模型中的表達(dá)變化，并初步探討其臨床意義。
　　方法:動物實驗選取6周齡的雄性C57BL/6小鼠，用0.2％cuprizone分別飼育2周與5周為實驗組，建立小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘模型;選取C57BL/6小鼠用正常飼料飼育5周為對照組。通過髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein，MBP)免

2、疫組化(immunohistochemistry，IHC)和Black Gold髓鞘染色方法，觀察髓鞘形態(tài)及脫失情況;Iba-1免疫組化檢測小鼠胼胝體內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞系細(xì)胞的集聚情況;MPO/Iba-1/GFAP免疫熒光雙染檢測Cathepsin C在小鼠腦組織的表達(dá)及細(xì)胞定位。臨床試驗采用酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)檢測Cathepsin C在多發(fā)性硬化(mu

3、ltiple sclerosis，MS)患者及非脫髓鞘神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者腦脊液(cerebrospinal fluid，CSF)中表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.MBP免疫組化及Black Glod髓鞘染色顯示:cuprizone飼育小鼠后有脫髓鞘改變，且5周組較2周組嚴(yán)重;對照組未見脫髓鞘改變。
　　2.Iba-1及Cathepsin C免疫組化結(jié)果顯示:實驗組胼胝體脫髓鞘部位可見小膠質(zhì)細(xì)胞大量集聚及Cathepsin

4、 C高表達(dá)，5周組較2周組明顯;對照組胼胝體部位小膠質(zhì)細(xì)胞少量集聚，Cathepsin C不表達(dá)。
　　3.MPO/Iba-1/GFAP免疫熒光雙染顯示:5周組胼胝體部位Cathepsin C大部分由小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)，部分由浸潤中性粒細(xì)胞表達(dá)。
　　4.MS患者腦脊液Cathepsin C水平高于非脫髓鞘神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者。
　　結(jié)論:
　　1.Cuprizone喂育小鼠可導(dǎo)致小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘改變。