LyGDI在肺癌中的表達(dá)及其臨床意義的研究.pdf

1、目的：通過研究鳥甘酸解離抑制因子-2(an inhibitor of guanine nucleotidedissociation for Rho proteins，LyGDI)在肺癌、癌旁組織及正常組織中的表達(dá)，探討其與肺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，以及它對(duì)肺癌放化療的影響，為肺癌的臨床診斷和治療提供理論基礎(chǔ)。 方法：(1)采用Western Blot方法、免疫組織化學(xué)染色法從蛋白水平檢測(cè)LyGDI在不同病理類型的肺癌組織中、癌旁組織以

2、及正常肺組織的表達(dá)差異；(2)采用RT-PCR方法從基因mRNA水平檢測(cè)LyGDI在不同病理類型的肺癌組織中、癌旁組織以及正常肺組織的表達(dá)差異；(3)以脂質(zhì)體法構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染LyGDI的肺腺癌A549細(xì)胞，用MTT法測(cè)定經(jīng)不同濃度順鉑(DDP)處理的轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的存活率來研究該細(xì)胞化學(xué)藥物的敏感性；采用克隆法測(cè)定不同劑量的60Coγ射線照射處理后細(xì)胞的存活率以檢測(cè)放射敏感性；采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同劑量60Coγ射線處理后細(xì)胞周期變化。

3、 結(jié)果：(1)Western Blot結(jié)果顯示：39份組織標(biāo)本中，LyGDI在29份肺癌組織中表達(dá)上調(diào)(P<0.05)，在小細(xì)胞肺癌(SCLC)與非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)中的表達(dá)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在NSCLC中，LyGDI的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，與性別、年齡、組織學(xué)分類、分期及分化程度無關(guān)(P>0.05)。免疫組化染色法和RT-PCR的結(jié)果與Western Blot一致。(2)采用順鉑和60Coγ射

4、線兩種方法處理細(xì)胞，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的LyGDI的肺腺癌A549細(xì)胞存活率明顯低于對(duì)照組。(3)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期提示60Coγ射線照射轉(zhuǎn)染LyGDI后的細(xì)胞可誘導(dǎo)G2期阻滯，和對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論：(1)LyGDI在肺癌中上調(diào)表達(dá)并與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。(2)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染外源性的LyGDI抑制肺腺癌A549細(xì)胞增殖及浸潤能力。(3)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染外源性的LyGDI增加了肺腺癌A549細(xì)胞的放射敏感性和化學(xué)藥