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文檔簡介
1、目的:研究COX-2抑制劑尼美舒利和EGFR單克隆抗體西妥昔單抗(Cetuximab,C225)聯(lián)合對結(jié)腸癌HT-29細胞增殖和凋亡的影響及其相關(guān)機制。
方法:選用不同濃度的西妥昔單抗(10~2000μg/ml)和尼美舒利(50~400μmol/L)單獨或聯(lián)合作用于結(jié)腸癌HT-29細胞,MTT法檢測細胞增殖狀態(tài);倒置顯微鏡及AO/EB染色法觀察細胞凋亡的形態(tài)學改變;流式細胞儀檢測細胞凋亡率;RT-PCR檢測COX-2、NA
2、G-1 mRNA的表達;Western Blot檢測EGFR通路下游相關(guān)蛋白Akt的磷酸化活性。
結(jié)果:尼美舒利與西妥昔單抗聯(lián)合作用于HT-29細胞48h,對細胞的生長抑制率(72.8±2.3)%明顯高于尼美舒利組(51.8士1.8)%。倒置顯微鏡下及AO/EB染色觀察到聯(lián)合組HT-29細胞發(fā)生典型的凋亡形態(tài)學改變,流式凋亡檢測顯示48h聯(lián)合組的凋亡率顯著高于尼美舒利、西妥昔單抗組(P<0.05)。西妥昔單抗下調(diào)COX-2
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