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1、目的:姜黃素是從天然植物姜黃根莖中提取的一種多酚,具有抗氧化、消炎、抗腫瘤、預(yù)防老年性癡呆、治療風(fēng)濕等多種功效。本論文旨在研究姜黃素對(duì)體外培養(yǎng)的人結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29、SW480細(xì)胞中β-catenin及VEGF表達(dá)的影響,從而探討姜黃素抑制細(xì)胞生長、增殖的分子機(jī)制。為臨床結(jié)腸癌的治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:1.利用實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time PCR)檢測(cè)藥物處理后HT-29、SW480細(xì)胞中β-cateni
2、n和VEGF的mRNA表達(dá)變化:每種細(xì)胞傳6瓶,陰性對(duì)照各一瓶,其中HT-29給藥濃度為21μmol/L,SW480給藥濃度為48μ mol/L,五瓶細(xì)胞分別用藥物干預(yù)6h、12h、24h、36h和48h,提取mRNA,用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)mRNA水平的變化。2.利用蛋白免疫印跡(Western-blot)檢測(cè)藥物處理腫瘤細(xì)胞后VEGF和β-catenin蛋白質(zhì)水平的表達(dá)變化:每種細(xì)胞傳5瓶,藥物干預(yù)的時(shí)間為6h、12h、24h及48h
3、,濃度同PCR。
結(jié)果:在mRNA表達(dá)水平,姜黃素處理HT-29細(xì)胞株,6h、12h、24h、36h和48h后,與對(duì)照組相比,β-catenin表達(dá)水平則為其1.04、0.40、0.31、0.29和0.27倍,VEGF表達(dá)水平為其0.93、0.47、0.36、0.32和0.30倍;姜黃素處理SW480細(xì)胞株6h、12h、24h、36h和48h后,與空白對(duì)照相比,β-catenin表達(dá)水平則為其0.91、0.45、0.34、
4、0.27和0.14倍,VEGF表達(dá)水平為其0.91、0.42、0.32、0.30和0.09倍,除外6h,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
在蛋白質(zhì)水平,姜黃素處理SW480細(xì)胞株6h、12h、24h和48h后細(xì)胞中VEGF及β-catenin表達(dá)情況分別為:2.2665±0.2774、1.9037±0.3051、1.5531±0.2461、1.1719±0.2718和0.7716±0.2486;0.924±0.1477、
5、0.6868±0.1115、0.4730±0.1498、0.2818±0.1308和0.0920±0.0447。姜黃素處理HT-296h、12h、24h和48h后細(xì)胞中VEGF及β-catenin表達(dá)情況分別為:1.2236±0.2345、0.9126±0.2091、0.6763±0.1807、0.4442±0.1947和0.2112±0.0967;0.9742±0.1601、0.7736±0.1309、0.5461±0.1564、0.
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