CNTF快速通路中主要構(gòu)成單元的探索.pdf

1、前期研究發(fā)現(xiàn)CNTF具有保護(hù)海馬神經(jīng)元應(yīng)激性損傷的快速作用,但其快速通路的構(gòu)成尚不清楚。為了探索CNTF快速通路中主要構(gòu)成單元,本研究以NMDA誘發(fā)海馬神經(jīng)元損傷模型,運(yùn)用活細(xì)胞連續(xù)照相、全細(xì)胞膜片鉗、細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度測(cè)定等方法,觀察CNTF對(duì)海馬神經(jīng)元的快速保護(hù)作用及Anti-CNTFRα和JAK/STAT通路阻斷劑PTPi-2對(duì)快速保護(hù)作用的影響。 主要研究方法： 1、用活細(xì)胞連續(xù)照相的方法觀察CNTF的細(xì)胞保護(hù)

2、作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2對(duì)保護(hù)作用的影響。 2、用全細(xì)胞膜片鉗的方法觀察CNTF對(duì)海馬神經(jīng)元興奮性的影響。 3、用全細(xì)胞膜片鉗的方法觀察CNTF對(duì)NMDA誘發(fā)INMDA的作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2對(duì)該作用的影響。 4、用共聚焦顯微鏡細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子測(cè)定的方法觀察CNTF對(duì)NMDA誘發(fā)[Ca2+]變化的作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2對(duì)該作用的影響。 根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3、得出主要結(jié)論如下： 1.活細(xì)胞連續(xù)照相結(jié)果顯示,CNTF具有細(xì)胞保護(hù)作用,Anti-CNTFRα可以阻斷CNTF的保護(hù)作用,但PTPi-2不能阻斷CNTF的保護(hù)作用。 2.全細(xì)胞膜片鉗結(jié)果顯示,CNTF對(duì)海馬神經(jīng)元興奮性無(wú)顯著影響,但對(duì)NMDA誘發(fā)電流有快速抑制作用。Anti-CNTFRα可以阻斷CNTF的抑制作用,但PTPi-2不能阻斷CNTF的抑制作用。 3.細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度測(cè)定結(jié)果顯示,CNTF對(duì)NMD