一氧化碳釋放分子CORM-2對小鼠腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：探討一氧化碳釋放分子CORM-2 減輕小鼠腎缺血再灌注損傷的作用及機(jī)制。
　　 方法：以8-10周左右的雄性BALB/C 小鼠為研究對象，建立小鼠腎臟原位缺血再灌注損傷模型，用血管鉗夾閉左側(cè)腎蒂，置于溫度為31.5攝氏度的嬰兒溫箱中60分鐘。然后立即松開血管夾，左腎恢復(fù)血流后切除右腎。小鼠隨機(jī)分為3組：（1）對照組，術(shù)前1 小時(shí)尾靜脈注射入DMSO （1mL/Kg）；（2）實(shí)驗(yàn)組：手術(shù)前1 小時(shí)尾靜脈注射溶有CORM-2的

2、DMSO(10mg/kg)；（3）假手術(shù)組，手術(shù)前一小時(shí)尾靜脈注射入DMSO （1mL/Kg）；術(shù)后24 小時(shí)檢測血肌酐（Cr）與尿素氮（BUN）值，并取對照組、實(shí)驗(yàn)組、假手術(shù)組腎臟標(biāo)本行HE和PAS 病理檢查，以免疫組化檢測腎組織內(nèi)HO-1、MPO、TUNEL的表達(dá)情況。將小鼠腎臟缺血時(shí)間延長到80分鐘以觀察CORM-2 對小鼠存活率的影響。
　　 結(jié)果：；對照組血肌酐和尿素氮分別是（102.21±42.15）μmol/L和

3、（56.69±15.46)mmol/L ；實(shí)驗(yàn)組為（24.19±9.99）μmol/L和(9.29±4.74)mmol/L ；假手術(shù)組為（18.85±10.24）μmol/L和（8.34±4.00）mmol/L。實(shí)驗(yàn)組腎功能（Cr與BUN）相對對照組顯著改善(P<0.05）。PAS 染色顯示對照組腎小管上皮細(xì)胞大片壞死、細(xì)胞核消失、毛細(xì)血管淤血、管型形成；實(shí)驗(yàn)組有少量腎小管上皮細(xì)胞壞死，但數(shù)量較對照組明顯減少。HE 顯示對照組大片腎小管

4、彌漫性壞死，實(shí)驗(yàn)組腎小管上皮細(xì)胞壞死明顯減少，大多數(shù)腎小管接近正常。免疫組化顯示假手術(shù)組腎組織內(nèi)HO-1表達(dá)極少，而實(shí)驗(yàn)組腎組織內(nèi)呈陽性彌散性表達(dá)，對照組HO-1 也有所表達(dá)，主要位于腎小管上皮細(xì)胞。免疫組化顯示對照組腎組織內(nèi)MPO在皮髓質(zhì)大量表達(dá)，而實(shí)驗(yàn)組MPO表達(dá)明顯減少。TUNEL 顯示對照組大量腎小管上皮細(xì)胞壞死崩解，皮髓質(zhì)交界處及局部髓質(zhì)區(qū)腎組織細(xì)胞漿大量凋亡小體，實(shí)驗(yàn)組凋亡細(xì)胞明顯減少。小鼠存活實(shí)驗(yàn)顯示CORM-2 可以明顯