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文檔簡(jiǎn)介
1、黑線(xiàn)倉(cāng)鼠(Cricetulus barabensis)是中國(guó)北方農(nóng)田害鼠的優(yōu)勢(shì)種之一,對(duì)人民的生活和健康造成了嚴(yán)重影響,其雄性個(gè)體具有顯著的季節(jié)性繁殖特點(diǎn),一年有春秋兩季的繁殖高峰,產(chǎn)仔快,短時(shí)間內(nèi)數(shù)量激增,可作為研究季節(jié)性繁殖的良好動(dòng)物模型。本研究以雄性黑線(xiàn)倉(cāng)鼠為研究對(duì)象,克隆鐘基因(Bmal1、Clock)部分基因序列并采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分析其在下丘腦和睪丸的表達(dá)規(guī)律,研究結(jié)果有助于理解鐘基因與季節(jié)性繁殖活動(dòng)的關(guān)系,并為進(jìn)一
2、步探究黑線(xiàn)倉(cāng)鼠季節(jié)性繁殖調(diào)控的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
測(cè)序共得到黑線(xiàn)倉(cāng)鼠Bmal1 cDNA序列1754bp(KU645887),全部為CDs,編碼584個(gè)氨基酸;共得到Clock cDNA序列911bp(KU645888),全部為CDS,編碼303個(gè)氨基酸。Bmal1和Clock都是HLH/PAS轉(zhuǎn)錄因子家族成員,均為疏水性蛋白,具有多個(gè)與晝夜節(jié)律和代謝活動(dòng)相關(guān)的作用位點(diǎn),聚類(lèi)分析表明二者在進(jìn)化上具有保守性。
從組織器
3、官表達(dá)來(lái)看,Bmal1和Clock在黑線(xiàn)倉(cāng)鼠的多個(gè)器官(腎臟、肝臟、脾臟、下丘腦、附睪、睪丸)中均有表達(dá),其中在下丘腦和睪丸中表達(dá)量最高,提示其可能與繁殖調(diào)控有關(guān)。從個(gè)體發(fā)育表達(dá)來(lái)看,Bmal1和Clock在雄性黑線(xiàn)倉(cāng)鼠的表達(dá)呈現(xiàn)出相似的規(guī)律,即在下丘腦和睪丸中的表達(dá)均是成年期表達(dá)量最高,說(shuō)明Bmal1和Clock對(duì)雄性黑線(xiàn)倉(cāng)鼠成體期生理狀態(tài)的維持發(fā)揮重要作用,推測(cè)與二者參與調(diào)節(jié)睪酮分泌,參與雄性繁殖調(diào)控有關(guān)。從季節(jié)性表達(dá)來(lái)看,兩個(gè)基因
4、在下丘腦和睪丸的表達(dá)并不一致。雄性黑線(xiàn)倉(cāng)鼠下丘腦中Bmal1在春季和秋季的表達(dá)顯著高于夏季和冬季,即在高繁殖季的表達(dá)顯著高于在低/非生殖季的表達(dá);但是,下丘腦中Clock在冬季的表達(dá)卻顯著高于春季、夏季和秋季;睪丸中Bmal1在冬季的表達(dá)量顯著低于其他三季,在春季、夏季、秋季的表達(dá)量沒(méi)有顯著差異(P<0.05)。睪丸中Clock在夏季的表達(dá)顯著高于春季、秋季和冬季,在春季、秋季和冬季的表達(dá)沒(méi)有顯著差異(P<0.05)。下丘腦中Bmal1
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