褪黑素和卵泡刺激素對(duì)雛雞原始卵泡形成及發(fā)育的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、母雞早期原始卵泡庫建立是其后期高產(chǎn)蛋量的基礎(chǔ)，研究母雞原始卵泡形成及其調(diào)節(jié)可為雌雞優(yōu)良原始卵泡庫建立奠定理論基礎(chǔ)。本文研究了褪黑素和卵泡刺激素(FSH)兩種激素對(duì)雛雞早期卵泡發(fā)育的調(diào)節(jié)作用，并探索了其部分作用機(jī)理，其結(jié)果可為雛雞早期卵泡發(fā)育的研究提供理論基礎(chǔ)，有助于家禽原始卵泡發(fā)生及其發(fā)育的深入研究。
　　1.褪黑素對(duì)雛雞早期卵泡發(fā)育的抑制作用
　　褪黑素對(duì)機(jī)體晝夜節(jié)律及與晝夜節(jié)律變化相關(guān)的激素分泌具有重要的調(diào)節(jié)功能，然而褪

2、黑素對(duì)雛雞早期卵泡發(fā)育的調(diào)節(jié)作用還不清楚。本實(shí)驗(yàn)在12日雞胚發(fā)育至6d雛雞過程中持續(xù)用褪黑素處理，然后檢測雛雞卵泡發(fā)育的變化。結(jié)果顯示，褪黑素處理(100pg/d)顯著降低左側(cè)卵巢中生殖細(xì)胞和體細(xì)胞的增殖活性，從而降低生殖細(xì)胞或生殖細(xì)胞簇的數(shù)量，導(dǎo)致原始卵泡生成的數(shù)量減少。褪黑素處理后下丘腦內(nèi)促性腺激素釋放激素抑制激素(GnIH)mRNA的表達(dá)量增高，但促性腺激素釋放激素(GnRH)-ⅡmRNA的表達(dá)量降低，垂體中FSH-β、卵巢內(nèi)卵泡

3、刺激素受體（FSHR）、黃體生成素受體（LHR）、雌激素受體（ER）、孕酮受體(PR)、芳香化酶（Cyp19a1）和3β-膽固醇脫氫酶(3βHSDⅡ)的mRNA表達(dá)量均顯著降低。免疫印跡結(jié)果表明，細(xì)胞增殖核抗原及生殖細(xì)胞標(biāo)記蛋白Dazl的表達(dá)量顯著降低。因此可知，褪黑素可能通過抑制下丘腦-垂體-卵巢軸的相關(guān)激素合成和表達(dá)，從而抑制生殖細(xì)胞和體細(xì)胞的增殖，由此影響原始卵泡的形成。
　　2.卵泡刺激素與干細(xì)胞因子共同調(diào)節(jié)雛雞原始卵泡的

4、發(fā)育
　　原始卵泡形成依賴于生殖細(xì)胞簇破裂、體細(xì)胞增殖及分化的準(zhǔn)確而有序地進(jìn)行。目前有關(guān)FSH和干細(xì)胞因子(SCF)對(duì)蛋雞卵巢組織中原始卵泡形成調(diào)節(jié)作用的研究較少。本實(shí)驗(yàn)采用FSH與SCF聯(lián)合處理雛雞的卵巢組織，研究了FSH和SCF對(duì)雛雞卵泡發(fā)育的調(diào)節(jié)作用，并探討了其作用機(jī)制。結(jié)果表明，體內(nèi)注射FSH后，雛雞卵巢皮質(zhì)中原始卵泡形成的數(shù)量增加，且FSH處理導(dǎo)致KIT信號(hào)通路元件的表達(dá)量增加，同時(shí)細(xì)胞增殖活性增強(qiáng)、細(xì)胞周期蛋白CCND

5、1和周期蛋白依賴性激酶CDK-2的表達(dá)量增加、細(xì)胞凋亡減少、E-鈣黏蛋白減少、N-鈣黏蛋白增加。這些結(jié)果提示，F(xiàn)SH對(duì)原始卵泡形成的促進(jìn)作用存在多種途徑。SCF與FSH聯(lián)合處理培養(yǎng)的卵巢組織，結(jié)果顯示SCF顯著加強(qiáng)FSH對(duì)與原始卵泡形成相關(guān)信號(hào)或蛋白的調(diào)節(jié)作用。RNAi干擾實(shí)驗(yàn)顯示，抑制SCF和c-KIT表達(dá)可抑制FSH對(duì)KIT信號(hào)的促進(jìn)作用，說明FSH可通過SCF與c-KIT信號(hào)途徑促進(jìn)原始卵泡的形成。以上結(jié)果提示，F(xiàn)SH可通過SCF