黃酮類活性成分配位色譜分離技術(shù)研究.pdf

1、天然產(chǎn)物活性成分常具有不同的藥理作用,實(shí)用中多需分離純化和分析檢測(cè).天然產(chǎn)物中的黃酮類化合物有數(shù)千種,其結(jié)構(gòu)類似,分離難度大.本文緊緊圍繞黃酮類化合物色譜分離過(guò)程的關(guān)鍵技術(shù)難題,以黃酮類化合物中的3類典型成分為對(duì)象,進(jìn)行配位色譜高效分離純化新技術(shù)研究. 作者通過(guò)分析計(jì)算配位劑和目標(biāo)組分的相互作用,構(gòu)建色譜分離模型、開(kāi)展配位色譜分離試驗(yàn),考察了配位劑對(duì)不同結(jié)構(gòu)黃酮苷元和黃酮苷的協(xié)同分離效果,初步解析了配位色譜分離原理,研究結(jié)果如下

2、: 1. 建立了以黃酮醇和異黃酮為目標(biāo)化合物的過(guò)渡金屬離子(Zn<'2+>、Ni<'2+>等)配位色譜精制純化方法.分子力場(chǎng)、量子力場(chǎng)計(jì)算和配位色譜分離試驗(yàn)結(jié)果顯示:過(guò)渡金屬離子與黃酮苷元不同部位的配位結(jié)合強(qiáng)度分別為:對(duì)于單獨(dú)的羥基3-OH,5-OH>3'-OH,4'-OH,5'-OH>7-OH;對(duì)于鄰位基團(tuán)C=O,C-OH>C-OFI,C-OH>C-OH,C-OCH3;對(duì)于不同區(qū)域A環(huán)>B環(huán)、A環(huán)下部>A環(huán)上部,-OCH<,3

3、>抑制鄰近基團(tuán)的配位. 2. 建立了以黃酮、黃酮醇和異黃酮為目標(biāo)化合物的β-環(huán)糊精配位色譜分析檢測(cè)方法.分子力場(chǎng)計(jì)算和配位色譜分離試驗(yàn)結(jié)果顯示:β-環(huán)糊精與黃酮苷元不同部位的配位結(jié)合強(qiáng)度依次是:-OCH<,3>>-H>-OH,B環(huán)>A環(huán)、A環(huán)上部>A環(huán)下部,-OCH<,3>促進(jìn)鄰近基團(tuán)的配位. 3. 發(fā)現(xiàn)葛根黃酮在不同的流動(dòng)相中保留行為各異.葛根素與3-甲氧基葛根素在四氫呋喃-水和甲醇-水流動(dòng)相中的出峰順序相反;流動(dòng)相為

4、四氫呋喃-水時(shí)分離度隨著流動(dòng)相極性的降低而增加,流動(dòng)相為甲醇-水時(shí)分離度隨著流動(dòng)相極性的降低而降低.化學(xué)計(jì)算分析表明,氫鍵在配位色譜分離中起關(guān)鍵性作用.在配位色譜中根據(jù)不同配位劑的性質(zhì)選擇相應(yīng)的流動(dòng)相. 4. β-環(huán)糊精可以調(diào)節(jié)葛根黃酮中葛根素與3-甲氧基葛根素在配位色譜中的分離度.使用四氫呋喃-水流動(dòng)相時(shí),較低濃度β-環(huán)糊精協(xié)同能提高葛根素與3-甲氧基葛根素的分離度,但過(guò)高濃度則會(huì)降低分離度. 5. 優(yōu)化葛根黃酮的配位