委陵菜黃酮類成分的含量測定及降血糖活性研究.pdf

1、中藥委陵菜（Potentilla chinensis Ser.）為薔薇科（Rosaceae）委陵菜屬（Potentilla L）植物的干燥全草，在全國大部分地區(qū)都有分布，藥材主產(chǎn)于山東、遼寧、安徽。其化學(xué)成分主要含有黃酮類、三萜類、甾體類、酚類及其衍生物，具有清熱解毒，涼血止痢等功效，用于赤痢腹痛、久痢不止、痔瘡出血、癰腫瘡毒，是被中華人民共和國藥典（2005版）收錄的唯一一種委陵菜屬植物。
　　目前，由于委陵菜與其近緣植物翻白草

2、（Potentilla discolor Bge.）的植物形態(tài)特征非常相似，民間將這兩種藥用植物混用來治療2型糖尿病。據(jù)文獻(xiàn)報道翻白草具有較好的降血糖藥理活性，且降血糖作用十分明確。本課題組在前期的研究中發(fā)現(xiàn)，從委陵菜中分離得到的化合物與翻白草中分離得到的化合物種類相似。為了探究民間將委陵菜與翻白草混用來治療糖尿病是否有科學(xué)依據(jù)，本文對委陵菜進(jìn)行了降血糖藥理活性的篩選。
　　本文對降血糖活性較強(qiáng)的委陵菜乙酸乙酯萃取部位進(jìn)行了分離、

3、提取及結(jié)構(gòu)鑒定。采用快速減壓柱層析、硅膠開放柱色譜、ODS反相柱色譜及 Sephadex LH-20凝膠過濾等手段分離得到了3個化合物，鑒定結(jié)構(gòu)為芹菜素、槲皮素和翻白葉苷A。
　　建立了高效液相色譜同時測定委陵菜中3中黃酮類成分（槲皮素、翻白葉苷A、芹菜素）的含量分析方法。以ZORBAX SB-C18(4.6mm×150mm，5μm)為色譜柱，甲醇-0.3％磷酸水溶液(51:49)為流動相，0.9mL/min的流速在360 nm檢

4、測波長下進(jìn)行檢測。結(jié)果，槲皮素、翻白葉苷A和芹菜素的進(jìn)樣量分別在0.72~10.08?g/mL（r=0.9999）、0.86~12.04g/mL（r=0.9999）和0.54~7.56g/mL（r=0.9999）范圍內(nèi)與其峰面積呈良好的線性關(guān)系，平均回收率分別為95.37%（RSD=1.79%）、96.87%（RSD=1.63%）和97.66%（RSD=2.08%），藥材中三中黃酮的含量分別為100.0μg/g、323.0μg/g和55

5、.0μg/g。建立起來的委陵菜黃酮類成分的含量測定方法為委陵菜的質(zhì)量控制奠定了基礎(chǔ)。
　　槲皮素、翻白葉苷A和芹菜素為評價指標(biāo)，考察乙醇濃度（A）、提取時間（B）、溶劑用量（C）、提取次數(shù)（D）四個因素，三個水平，應(yīng)用 L9(34)正交設(shè)計實(shí)驗方案優(yōu)化了委陵菜總黃酮的提取工藝。
　　初步的抗糖尿病藥效學(xué)研究表明，委陵菜的不同方法提取物均對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病小鼠有不同程度的降血糖活性。其中，委陵菜水提液和乙酸乙酯萃取部分的降