吡唑并[1,5-a]吲哚類化合物的合成及其與DNA、DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ相互作用的研究.pdf

1、Hajime Katayama課題組于1997年報(bào)道了吡唑并[1,5-α]吲哚類化合物的合成方法，并在藥理活性研究中發(fā)現(xiàn)該類化合物的三氟甲磺酸鹽衍生物具有很強(qiáng)的抑制腫瘤細(xì)胞的活性。隨后本課題組于2007年設(shè)計(jì)了一種合成吡唑并[1,5-α]吲哚類化合物的方法：用Cu催化分子內(nèi)的C-N鍵偶聯(lián)的氨基化反應(yīng)，合成了一系列類似骨架化合物及衍生物。為進(jìn)一步探討該類化合物的合成方法和抗腫瘤機(jī)制，本文設(shè)計(jì)了新型的合成路線，并從化合物與DNA間的作用揭示

2、了抗腫瘤活性構(gòu)效。
　　 為增加該類化合物的多樣性，本論文設(shè)計(jì)了使用對(duì)位含有不同取代基的苯甲醛與吡唑并[1,5-α]吲哚類化合物骨架及其結(jié)構(gòu)類似物進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)。通過(guò)對(duì)反應(yīng)的研究和討論，結(jié)果表明，采用InCl3作為L(zhǎng)ewis酸，在苯甲醛對(duì)位取代基為二取代氨基的情況下可以以高收率得到相應(yīng)的偶聯(lián)產(chǎn)物。將偶聯(lián)產(chǎn)物進(jìn)一步用Mel甲基化，最終得到吡唑并[1,5-α]吲哚類化合物碘鹽衍生物。
　　 本研究按已有的合成路線合成了8個(gè)吡唑

3、并[1,5-α]吲哚類化合物三氟甲磺酸鹽衍生物：6-甲基-11-(4-二甲氨基芐烯)-7，8，9，10-四氫-11H-吲哚[1,2-b]吲噠唑三氟甲磺酸鹽(BY1)，1-甲基-4-(4-二甲氨基芐烯)-4H-環(huán)戊烷[1,2-c]吡p坐[1,5-α]吲哚三氟甲磺酸鹽(BY2)，1-甲基-2-苯基-6-氯-4-(4-二甲氨基芐烯)-4H-吡唑[1,5-α]吲哚三氟甲磺酸鹽(BY3)，6-甲基-11-(4-二甲氨基芐烯)-7，8，9，10-四

4、氫-11H-苯[1,2-g]吲哚[1,2-b]吲噠唑三氟甲磺酸鹽(BY4)，1,2-=甲基-4-(4-二甲氨基芐烯)-4H-吡唑[1,5-α]吲哚-3-甲酸乙酯三氟甲磺酸鹽(BY5)，1-甲基-2-苯基-4-(4-二甲氨基芐烯)-4H-吡唑[1,5-α]吲哚三氟甲磺酸鹽(BY6)，2-氯-6-甲基-11-(4-二甲氨基芐烯)-7，8，9，10-四氫-11H-吲哚[1,2-b]吲噠唑三氟甲磺酸鹽(BY7)，1-甲基-2-苯基-6-氟-4-

5、(4-二甲氨基芐烯)-4H-吡唑(1,5-α]吲哚三氟甲磺酸鹽(BY8)。比較了該類化合物的三氟甲磺酸鹽衍生物對(duì)DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ活性的抑制作用。通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)對(duì)8個(gè)化合物進(jìn)行了評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，化合物BY1-BY8均能不同程度的抑制DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ的活性，并且在DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的活性完全被抑制后，化合物表現(xiàn)出與DNA的直接靜電作用，使質(zhì)粒DNA條帶拖尾后移。其中化合物BY4對(duì)DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ的抑制作用最強(qiáng)，在濃度為8μM時(shí)

6、就完全阻礙了酶對(duì)質(zhì)粒DNA的解超螺旋作用。
　　 為進(jìn)一步研究吡唑并[1,5-α]吲哚類化合物的抗腫瘤作用機(jī)制，我們對(duì)化合物與DNA間的作用方式進(jìn)行了研究。采用紫外光譜法，熒光光譜法，圓二色譜法，粘度法，瓊脂糖凝膠電泳法研究了它們與DNA的相互作用。結(jié)果表明，化合物BY1-BY8均能與DNA發(fā)生不同程度的作用，且作用方式主要為插入作用，同時(shí)也存在靜電相互作用。其中，化合物BY4因其分子中存在有萘環(huán)而平面性好，插入性強(qiáng)，故其與DN