內(nèi)皮素-1基因外顯子多態(tài)性與慢性阻塞性肺疾病的相關(guān)性分析.pdf

1、目的:
　　通過從基因水平上分析廣東省深圳市漢族COPD患者內(nèi)皮素-1基因外顯子區(qū)單核苷酸的多態(tài)性，探討其在COPD發(fā)病機(jī)制中的作用，為COPD的預(yù)防和治療提供理論基礎(chǔ)。
　　方法:
　　以廣東深圳地區(qū)70例COPD患者和70例健康對照者為研究對象，利用DNA抽提試劑盒提取實驗對象的外周血DNA，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chainreaction，PCR)對兩組外周血細(xì)胞DNA中的ET-1基因外顯子區(qū)

2、的1個單核苷酸多態(tài)性位點的DNA序列進(jìn)行擴(kuò)增。應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)的技術(shù)對該位點的擴(kuò)增序列進(jìn)行基因型檢測。應(yīng)用夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清ET-1的濃度。分析兩組實驗對象一般資料（年齡、吸煙指數(shù)、肺功能等）并計算該位點發(fā)生單核苷酸多態(tài)性的百分比，并分析

3、各位點單核苷酸多態(tài)性與慢性阻塞性肺病易感相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　1.COPD組血清ET-1水平明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(49.21±15.53比28.99±10.20,P＜0.05)。
　　2.在70例COPD患者中，其中24例患者的外周血細(xì)胞ET-1基因外顯子區(qū)G198T位點存在單核苷酸多態(tài)性(34.3％)，其中有19例患者的外周血細(xì)胞ET-1基因外顯子區(qū)G198T位點呈現(xiàn)為雜合突變型(GT)(27.1

4、％)，有5例患者外周血細(xì)胞ET-1基因外顯子區(qū)G198T位點呈現(xiàn)為純合突變型(TT)(7.2％);在70例健康對照組中，有8例健康者的該基因位點出現(xiàn)單核苷酸多態(tài)性(11.4％)，其中有6例患者呈現(xiàn)為雜合突變型(GT)(8.7％)，有2例患者呈現(xiàn)為純合突變型(TT)(2.7％)，COPD組G198T的GT與TT基因型頻率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）;該位點的基因型頻率相對風(fēng)險性分析發(fā)現(xiàn)GG基因型患COPD的風(fēng)險是GT+

5、TT基因型的0.247倍(P＜0.05，OR=0.247，95％CI:0.102～0.600);G等位基因是T等位基因的0.294倍，兩組等位基因頻率差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05，OR=0.294，95％CI:0.137～0.631)。
　　3.COPD組的肺功能[一秒用力呼氣量(FEV1)、用力肺活量(FVC)及FEV1/FVC％]明顯低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）;在COPD患者中G198T的TT基因型肺

6、功能明顯低于GG基因型和GT基因型，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.ET-1參與COPD的病理過程，可能對COPD發(fā)生起著重要作用。
　　2.廣東省深圳地區(qū)漢族COPD患者外周血細(xì)胞DNA上的ET-1基因外顯子區(qū)G198T位點存在單核苷酸多態(tài)性，G198T位點的G型等位基因可能對本地區(qū)漢族人群COPD患者具有保護(hù)作用。
　　3.COPD人群中，G198TTT基因型可能是導(dǎo)致肺功能下降的危險