皮膚鱗癌中E-鈣粘素基因啟動子甲基化狀態(tài)的研究.pdf

1、本研究的目的是研究皮膚鱗癌中E-cadherin蛋白的表達和E-cadherin基因CpG島甲基化與其mRNA表達的關(guān)系，探討E-cadherin基因甲基化在皮膚鱗狀細胞癌發(fā)病機制中的作用。 方法:采用SABC免疫組化法，檢測26例不同分化程度的皮膚鱗狀細胞癌及10例正常皮膚石蠟包埋組織標本中的E-cadherin的表達與定位。采用圖像分析系統(tǒng)對蛋白表達進行定量分析，比較正常對照組與不同分化程度鱗狀細胞癌之間E-cadherin

2、蛋白表達差異，分析E-cadherin蛋白在皮膚鱗狀細胞癌臨床Ⅰ期至Ⅲ期的表達差異。采用甲基化特異性PCR(MSP)檢測皮膚鱗癌和正常組織中E-cadherin基因CpG島的甲基化狀態(tài)，并通過RT-PCR檢測人表皮鱗癌細胞株A431經(jīng)不同濃度去甲基化藥物5—氮胞苷處理后E-cadherin mRNA表達的差異，用MTT法觀察5—氮胞苷對細胞增殖的影響。 結(jié)果:正常皮膚和皮膚鱗狀細胞癌的細胞胞漿中均表達E-cadherin。與正常

3、對照組相比，皮膚鱗癌皮損中的E-cadherin的表達明顯下調(diào)(P<0.05)。皮膚鱗狀細胞癌中，從Ⅰ期到Ⅲ期，E-cadherin的表達逐漸降低，Ⅲ期與Ⅰ期、Ⅱ期相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。在皮膚鱗癌中E-cadherin基因的CpG島的甲基化率是34.6％(9／26)，而正常皮膚組織中是0％(0／10)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。皮膚鱗癌中E-cadherin基因甲基化與腫瘤的分化程度(P=0.031)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)

4、移(P=0.011)以及患者年齡(P=0.012)有關(guān)，與性別無關(guān)(P=0.873)。經(jīng)去甲基化藥物5’一氮胞苷處理后A431腫瘤細胞E-cadherin的mRNA表達上調(diào)，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。5，一氮胞苷抑制A431腫瘤細胞的生長。 結(jié)論 1．與正常皮膚組織相比，皮膚鱗癌中E-cadherin蛋白表達是下調(diào)的。 2．皮膚鱗癌中E-cadherin基因CpG島甲基化率明顯高于正常組織，與腫瘤的分化程度